Page 42 - 《华中农业大学学报(自然科学版)》2023年第2期
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36                                 华 中 农 业 大 学 学 报                                    第 42 卷

                                                                的反应时间 30~60 min,而 PCR 方法需要 1~2 h,
                                                                LAMP 方法耗时较短;PCR 方法需要专门的仪器
                                                                设备,仪器成本高、操作步骤繁琐等,而 LAMP 方
                                                                法需要的设备简易、操作简单,可视化检测更是可
                                                                肉眼直接观察试验结果,大大提升了临床的应用
                                                                价值。


                                                                参考文献References
                                                               [1] 谢倩茹,姜鹏,彭清洁,等 . 牛溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆
                 M: DL2000 DNA marker; 1~5:不同正常小鼠的肺组织; 6~10:        菌 A 型、B 型的比较鉴定研究[J]. 中国奶牛,2015(14):48-54.
               免疫后 7 d 的不同小鼠肺组织; 11~15:免疫后 21 d 的不同小鼠肺              XIE Q R,JIANG P,PENG Q J,et al.Study on comparative iden⁃
               组织;16:阴性对照; 17:阳性对照。M: DL2000 DNA marker;            tification for cattle Mannheimia haemolytica,Pasteurella multo⁃
               1-5:  Different  lung  tissues  of  normal  mice;  6-10:  Lung  tissues  of   cida type A and B strains[J].China dairy cattle,2015(14):48-54
               mice 7 d after immunization; 11-15: Lung tissues of mice 21 d after   (in Chinese with English abstract).
               immunization; 16: Negative control; 17: Positive control.  [2] NOYES N R,BENEDICT K M,GOW S P,et al.Mannheimia
                    图7  可视化lktC-LAMP方法和普通PCR方法                      haemolytica in feedlot cattle:prevalence of recovery and associa⁃
                              检测阴性小鼠肺组织                             tions with antimicrobial use,resistance,and health outcomes[J].
                    Fig.7  Comparison of visual LAMP and PCR        Journal of veterinary internal medicine,2015,29(2):705-713.
                                                               [3] 刘心,彭清洁,彭永崇,等 . 牛溶血曼氏杆菌的分离鉴定及药敏
                          to detect negative mice tissues
                                                                    试 验[J]. 中 国 兽 医 学 报 ,2020,40(6):1131-1135. LIU  X,
                                                                    PENG Q J,PENG Y C,et al.Isolation,identification and drug
                                                                    sensitivity test of Mannheimia haemolytica in cattle[J].Chinese
                                                                    journal of veterinary science,2020,40(6):1131-1135 (in Chi⁃
                                                                    nese with English abstract).
                                                               [4] KLIMA  C  L,ZAHEER  R,BRIGGS  R  E,et  al. A  multiplex
                                                                    PCR assay for molecular capsular serotyping of Mannheimia hae⁃
                                                                    molytica  serotypes  1,2,and  6[J]. Journal  of  microbiological
                                                                    methods,2017,139:155-160.
                                                               [5] 刘晓丹 . 六种牛源致病性细菌多重 PCR 检测方法的建立[D].
                                                                    哈尔滨:东北农业大学,2013.LIU X D.Development of multi⁃
                                                                    plex PCR for detection of pathogenic bacteria[D].Harbin:North⁃
                 M: DL2000 DNA marker;1~5:攻毒后未死亡的不同小鼠肺组             east Agricultural University,2013 (in Chinese with English ab⁃
               织;6~15:攻毒后死亡的不同小鼠肺组织;16:阴性对照;17:阳性对                  stract).
               照。M: DL2000 DNA marker;; 1-5:Different lung tissues of mice   [6] 李富祥,李华春,洪琼花,等 . 溶血性曼氏杆菌 TaqMan 荧光定
               that did not die after chllenged; 6-15: Different lung tissues of dead   量 PCR 检测方法的建立及应用[J]. 中国兽医科学,2016,46
               mice after chllenged;16: Negative control; 17: Positive control.  (10):1213-1218.LI F X,LI H C,HONG Q H,et al.Develop⁃
                      图8  可视化LAMP方法和普通PCR方法                         ment and application of TaqMan real-time PCR assay for the de⁃
                              检测阳性小鼠肺组织                             tection  of  Mannheimia  haemolytica[J]. Chinese  veterinary  sci⁃
                    Fig.8  Comparison of visual LAMP and PCR        ence,2016,46(10):1213-1218 (in  Chinese  with  English  ab⁃
                           to detect positive mice tissues          stract).
                                                               [7] 许淑玉 . 牛支原体、多杀性巴氏杆菌、溶血曼氏杆菌多重 PCR-
                                                           -1
               氏 杆 菌 A6-ZMD 菌 液 的 灵 敏 度 下 限 为 6.7×10
                                                                    ELISA 检测方法的建立及初步应用[D]. 长春:吉林农业大学,
                                                         2
               cfu/μL,lktC 质粒的灵敏度检测限为 7.9×10  cop⁃
                                                                    2018.XU S Y.Development and primary application of a multi⁃
               ies/μL,相较于普通 PCR 检测菌液的灵敏度检测限                         plex  PCR-ELISA  for  the  identification  of  Mycoplasma  bovis,
                      0
                                                         3
               6.7×10  cfu/μL 和质粒灵敏度检测限 7.9×10  cop⁃                Pasteurella mutocida and Mannheimia haemolytica[D].Changc⁃
               ies/μL有显著的提高。有研究表明,溶血性曼氏杆菌                           hun:Jilin Agricultural University,2018 (in Chinese with English
                                                                    abstract).
               gcp-LAMP实时浊度法检测质粒的灵敏度为 0.855×
                                                               [8] 谢佳芮,寇美玲,苗海生 .环介导等温扩增技术的最新研究进展
                 -4
               10  ng/μL,灵敏度大约是 gcp-LAMP 实时浊度浊                      [J]. 畜牧与兽医,2021,53(2):119-125.XIE J R,KOU M L,
               法的 1 000 倍  [13] 。另外,在便捷性上,LAMP 方法                   MIAO H S.Latest progress in research on loop-mediated isother⁃
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