Page 33 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2023年第2期

第 2 期 王宇 等：山羊痘弱毒疫苗 （AV41 株） 接种途径和剂量对牛抗体反应的影响 27

表2 免疫后0~60 d中和试验法检测试验牛血清中和抗体结果（滴度）值
Table 2 Neutralising antibody titer level in experimental cattle between 0 and 60 days post vaccination

组别 牛号 接种后时间/d Time post vaccination
Group Cattle ID 0 15 30 45 60
1 - (<1∶5) + (1∶640) + (1∶640) + (1∶320) + (1∶640)
2 - (<1∶5) - (<1∶5) - (1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
A 3 - (<1∶5) - (1∶10) + (1∶160) + (1∶40) + (1∶40)
4 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
5 - (<1∶5) + (1∶640) + (1∶640) + (1∶640) + (1∶640)
6 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
7 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
B 8 - (<1∶5) + (1∶320) + (1∶640) + (1∶320) + (1∶320)
9 - (<1∶5) 1∶5 - (1∶10) - (1∶5) - (<1∶5)
10 - (<1∶5) + (1∶20) - (1∶10) - (1∶5) - (<1∶5)
11 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
12 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
C 13 - (<1∶5) + (1∶40) + (1∶40) + (1∶20) + (1∶20)
14 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
15 - (<1∶5) + (1∶640) + (1∶640) + (1∶320) + (1∶640)
16 - (<1∶5) - (<1∶5) + (1∶40) + (1∶40) + (1∶40)
17 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
D 18 - (<1∶5) - (<1∶5) - (1∶10) - (<1∶5) - (<1∶5)
19 - (<1∶5) - (<1∶5) + (1∶40) + (1∶80) + (1∶320)
20 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
21 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
22 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
E 23 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
24 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
25 - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5) - (<1∶5)
注：“-”表示中和抗体滴度为阴性（<1∶20）；“+”表示中和抗体滴度为阳性（≥1∶20）。Note：“-” represents that the neutralising anti⁃
body titer is negative （<1∶20）； “+” represents that the neutralising antibody titer is positive（≥1∶20）.
正 态 性 分布（Shapiro-Wilk test，P= 0.227）。VNT 随后逐渐下降 ［13-14］ 。同时我们发现，并不是所有免
相较 ELISA 更加敏感，可通过所构建的简单线性方 疫牛都能检测到中和抗体反应，15 d免疫牛抗体转阳
程实现VNT与ELISA结果的相互转换。 率为 60%（3/5）。据报道，山羊痘和绵羊痘等弱毒疫
［7］
苗接种牛体后的血清抗体转阳率在20%~60% ，与
3 讨 论
我们的研究结果类似。统计目前国际上使用的 10余
鉴于目前 LSD 在我国和周边国家广泛流行的现 种 LSDV 疫苗，除最近获批的 1 种灭活疫苗外，其余
状，山羊痘弱毒疫苗已成为预防和控制 LSD 的必要 都是弱毒活疫苗，包括山羊痘和绵羊痘弱毒活疫苗
且重要手段之一，因此，选择合适的免疫剂量和免疫 和 LSDV 弱毒疫苗（如：Neethling 疫苗）。所有弱毒
途径来完善现有的免疫程序已成为养牛者急切关心 疫苗均采用皮下注射接种 ［15-16］ 。综合国际上相关疫
的问题。 苗的免疫程序和本研究的试验结果，牛皮下接种 5倍
3.1 皮下接种 5 倍羊剂量诱导最强的中和抗体 羊剂量的免疫程序是可行的。
反应 3.2 不同剂量和接种途径免疫山羊痘弱毒疫苗的
本研究发现，皮下免疫 5倍羊剂量组诱导的中和 牛体安全性
抗体反应产生时间早，且抗体滴度明显高于其他组。 本研究使用 PCR 检测法未发生病毒血症以及鼻
这与之前国际上的其他研究所报道相似，即：免疫后 咽腔排毒现象。虽然 5 倍羊剂量皮下免疫组的 2 头
10~15 d 开始出现免疫抗体，并于 30 d 后达到顶峰， 牛出现了轻微的皮肤结节反应，但未见全身性反应，