Page 46 - 《华农农业大学学报》2020年第2期
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第 ３９ 卷 第 ２ 期                     华   中   农   业   大   学   学   报                      Vol．３９ No．２
               ２０２０ 年  ３ 月                  JournalofHuazhon gA g riculturalUniversit y        Mar．２０２０ , ４０~４６


               陈一铭, 顾泽茂, 李莉娟, 等 ． 白斑综合征病毒感染对克氏原螯虾肠道菌群的影响 [ J ] ． 华中农业大学学报, ２０２０ , ３９ ( ２ ): ４０Ｇ４６．
               DOI : １０．１３３００ / j ．cnki．hnlkxb．２０２０．０２．００６

                       白斑综合征病毒感染对克氏原螯虾肠道菌群的影响


                                  陈一铭 , 顾泽茂          １ , ２ , 李莉娟 , 陈天圣 , 袁军法           １ , ３
                                          １
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                            １． 华中农业大学水产学院, 武汉 ４３００７０ ; ２． 华中农业大学双水双绿研究院, 武汉 ４３００７０ ;
                                       ３． 湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心, 武汉 ４３００７０


                       摘要   为揭示白斑综合征病毒( whites p ots y ndromevirus , WSSV ) 感染克氏原螯虾( Procambarusclarkii )
                   后对其肠道菌群的影响, 运用１６SrDNA 基因的高通量测序技术分析健康与人工感染 WSSV 的克氏原螯虾的肠
                   道菌群的组成及多样性.结果显示, 感染组与对照组在肠道丰度及多样性无显著差异, 但其优势菌群组成发生
                   变化.对照组优势菌门为变形菌门( Proteobacteria ) 和软壁菌门( Tenericute ), 分别占 ７５．４２％ 和 １９．１７％ ; 感染组
                   肠道优势菌门为变形菌门和拟杆菌门( Bacteroidetes ), 分别占 ７８．１４％ 和 １７．３８％ .利用 LEfSe分析差异菌属发
                   现, 感染组与对照组相比, Candidatusbacillo p lasma 丰度显著减少( P＜０．０５ ), 拟杆菌科( Bacteroidaceae ) 和黄杆
                   菌科( Flavobacteria ) 的丰度显著上升( P＜０．０５ ).此外, 部分潜在病原菌如黄杆菌属( Flavobacterium )、 气单胞
                   菌属( Aeromonas ) 的丰度在感染后显著升高( P＜０．０５ ).以上结果说明 WSSV 感染导致克氏原螯虾肠道菌群发
                   生变化, 提示 WSSV 或可通过干扰肠道稳态致病.
                       关键词   甲壳动物;克氏原螯虾;肠道菌群;白斑综合征病毒;高通量测序; LEfSe分析;稻田养虾
                                          ＋
                       中图分类号  Q９５９．２２３ ．６３   文献标识码  A   文章编号  １０００Ｇ２４２１ ( ２０２０ ) ０２Ｇ００４０Ｇ０７
                  克 氏 原 螯 虾 ( Procambarusclarkii ) 俗 称 小 龙     化, 甚至影响肠道黏膜的完整性, 导致 肠道细菌转
               虾, 在分类上属动物界( Animalia )、 节肢动物门( ArＧ 位, 引发 细 菌 继 发 感 染                [ ７Ｇ８ ] . WSSV 感 染 诱 导 甲 壳
               thro p oda )、 甲壳纲( Crustacea )、 十足目( Deca p oda )、 动肠道正常菌群的改变已在中华绒螯蟹( Eriocheir
               螯虾科( Cambaridae )、 原螯虾属( Procambarus ), 原 sinensis ) 、凡 纳 滨 对 虾 ( Lito p enaeus vanＧ
                                                                        [ ９ ]
               产于美洲. １９１８ 年, 由美国引进日本, １９２９ 年又由                 namei ) 中被报道, 但在克氏原螯虾这一新兴的养
                                                                      [ １０ ]
               日本传入我国       [ １ ] .近年来, 随着稻田综合种养模式             殖虾中却没有研究.本试验通过人工感染, 比较健
               的推广, 湖北省克氏原螯虾养殖规模日益壮大, 克氏                       康与 WSSV 感 染 克 氏 原 螯 虾 的 肠 道 菌 群, 分 析
               原螯虾成为重要的淡水经济虾类.与此同时, 克氏                         WSSV 感染对克氏原螯虾肠道菌群的影响, 旨在为
               原螯虾养殖过程中的病害也逐渐暴露, 流行病学调                         WSSV 的防控提供科学依据.

               查显示白 斑 综 合 征 病 毒 ( whites p ots y ndromeviＧ
                                                               1 材料与方法
               rus , WSSV ) 是克氏原螯虾最为主要的病原之一, 给
               养殖造成了很大的损失            [ ２Ｇ３ ] .尤为严重的是养殖小        1.1  试验材料
               龙虾携带 WSSV 较为 普遍, 使得 WSSV 的防控形                        试验用克氏原螯虾( 体质量( ２５±５ ) / 只) 由潜
                                                                                                    g
               势更为严峻      [ ２ ] .                              江龙居湾稻虾共生专业合作社提供, 试验前经过 １
                   肠道菌群与宿主营养、 免疫息息相关                [ ４Ｇ５ ] .肠道  周的池塘水室内暂养, 暂养水温 ２４℃ 左右.
               微生物群落可以帮助宿主促进营养吸收, 刺激免疫                         1.2  人工感染
               反应和提高疾病抵抗力, 从而对宿主的健康起至关                              试验虾经饥饿处理 １ 周后, 随机分为 ２ 组, 每组
               重要的作用      [ ６ ] .近年来研究表明, 病毒入侵会使肠              各 ２０ 只.感染组自第 ４ 步足基部注射经 PBS 溶液
               道菌群发生紊乱, 菌群丰度、 多样性以及功能发生变                       稀释的 WSSV 病毒悬液 １００ μ L , 含 １×１０ 拷贝的
                                                                                                      ７

               收稿日期: ２０１９Ｇ０９Ｇ２２
               基金项目:湖北省现代农业产业技术体系稻田综合种养创新团队和湖北省技术创新专项( ２０１８ABA１０３ )
               陈一铭, 硕士研究生 ． 研究方向: 水生动物医学 ．EＧmail : ２０８６６５４７１８＠ qq ．com
               通信作者:袁军法, 博士, 副教授 ． 研究方向:水生动物医学 ．EＧmail : j f y uan＠mail．hzau．edu．cn
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