Page 37 - 《华农农业大学学报》2020年第3期
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                 ２ ) 接种黄萎病菌对棉苗叶片 PAL 活性的影响. 且 H ２O ２ 是 诱 导 GST 基 因 表 达 的 主 要 信 号 分
               接种黄萎病菌后, 在不同时段 分 别 对 鄂 棉 ２２ ( S )、 子               [ １３ ] .在接种后的不同时段对鄂棉 ２２ ( S )、 Pima９０
               Pima９０ ( R ) 和海 / 陆嫁接棉苗( S / R ) 等三 者叶片中        ( R ) 和嫁接棉苗( S / R ) 上部叶片取样, 抽提 RNA , 以
               PAL 活性进行测定, 结果表明感染病原菌后, 棉苗                      组成 性 表 达 的 Histon３ 基 因 作 为 对 照, 取 ５ n g
               叶片中 PAL 活性均有明显升高( 图 ４ ).其中, 抗病                  RNA 进行 RTＧPCR .结果( 图 ５A ) 显示: 对于 GST
               品种 Pima９０ ( R ) 的 PAL 酶活在接种后 ０~２４h内持            基因, 接种前其 RTＧPCR 产物在含 EB 的琼脂糖凝
               续升高, 在２４h处达高峰, 峰值为８８．５U /( min ), 胶中呈现较清晰的条带, 说明 GST 此 时就有一定
                                                     g
               在 ２４h 之后开始缓慢下降, 到 １９２h 后接近初始水                   水平的表达; 接种后, 条带变粗变亮, 说明 GST 上
               平.感病品种鄂棉 ２２ ( S ) 的 PAL 活性上升缓慢, 峰               调表达.其中, 在 R 和 S / R 中, 接种后 ８h 到 ４８h
               值出 现 在 ４８h 处, 峰 值 较 小 为 ５８ U /(  min ), 均呈现高水平表达; 在 S 中, 接种后 ８h 到 １６h 也
                                                    g
               ４８h 后快速下降, 在 ９６h 与 １９２h 处, PAL 活性水              呈现高水平表达, 而在 ４８h 后表达下降, 条带亮度
               平接近.海 / 陆嫁接棉苗( S / R ) 的 PAL 活性介于两              与接种前 接 近. 对 于 PAL 基 因, 接 种 前 R 中 的
               者之间, 且 表 现 出 与 Pima９０ ( R ) 中 相 同 的 变 化 趋       RTＧPCR 产物也呈现较清晰的条带, 说明 PAL 基
               势, 峰值为 ７４U /( min ) 也出现在 ２４h 处.在接             因也有一定水平的表达; 而此时 S 和 S / R 中条带模
                               g
               种后的 １９２h , 各处理与相应对照叶片中 PAL 活性                   糊, 表达量很低.接种后, PAL 基因在Pima９０ ( R )、
               接近.与 POD 活性相似, 在黄萎病菌接种之前 S / R 鄂棉 ２２ ( S ) 和嫁接棉苗( S / R ) 中具有相似的表达模
               的 PAL 活性也较 S 和 R 的高.                            式即 PAL 基因表达明显增强, 条带均变粗变亮, 且
               2.4  接种黄萎病菌对棉苗叶片 PAL 和 GST 基因                   呈现出波动性变化的趋势, 在接种后 ８h 和 ４８h 扩
               表达的影响                                           增条带较亮, 在 １６h 处条带较弱.但 PAL 基因在
                 １ ) Pima９０ ( R )、 鄂 棉 ２２ ( S ) 和 海 / 陆 嫁 接 棉 苗 Pima９０ ( R )表达量高, 在鄂棉 ２２ ( S ) 中表达量低, 在
               ( S / R ) 接种 黄萎病菌后 叶 片 中 GST 和 PAL 基 因          嫁接棉苗( S / R ) 中的表达量介于二者之间.接种前
               RTＧPCR 分析.在对大丽轮枝菌毒素诱导的棉花悬                       后 Histon３ 基因的条带始终保持较粗较亮的状态,

               浮细胞抗性反应中 GST 基因的表达起重要作用, 说明持续高水平表达.
























                A : 棉苗叶片中 GST 和PAL 基因 RTＧPCR 电泳图谱; B : 棉苗叶片中 GST 基因相对表达水平; C : 棉苗叶片中 PAL 基因相对表达水平.
               A : InＧ g elRTＧPCRex p ressionofGST andPALg enesincottonleaves ; B : Relativeex p ressionofGST g eneincottonleaves ; C : RelativeexＧ
               p ressionofPAL g eneincottonleaves．
                                       图 ５  接种黄萎病菌后棉苗叶片 GST 和PAL 基因表达分析
                    Fi g ．５ Ex p ressionanal y sisofPALandGSTg enesincottonleavesafterinoculationwithVerticilliumdahlia Kleb

                 ２ ) Pima９０ ( R )、 鄂 棉 ２２ ( S ) 和 海 / 陆 嫁 接 棉 苗 Pima９０ ( R ) 和海 / 陆嫁接棉苗( S / R ) 上部叶片 RNA
               ( S / R ) 接种黄 萎病菌后 GST 和 PAL 基因的 realＧ 样品进 行 realＧtimePCR 分 析, 结 果 表 明: 接 种 后
               timePCR 分析.对接种后的不同时段鄂棉 ２２ ( S )、 GST 基因在 Pima９０ ( R )、 鄂棉 ２２ ( S ) 和海 / 陆嫁接
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