2021, 40(1):112-119.
摘要:在18℃和25℃ 2种温度下，对克氏原螯虾注射剂量为20 μg/kg的恩诺沙星药液，分析恩诺沙星和环丙沙星在克氏原螯虾体内的药物动力学特征和残留规律。结果显示，恩诺沙星及环丙沙星在血淋巴、肌肉、肝胰腺中回收率80%～110%，检测值日内变异系数均小于5%，日间变异系数均小于6%，检测限均在0.01 μg/mL(μg/g)以下。18℃时恩诺沙星在克氏原螯虾血淋巴、肌肉、肝胰腺中的Tmax分别为0.0830、0.3447、1.9335 h，25℃时恩诺沙星在克氏原螯虾血淋巴、肌肉、肝胰腺中的Tmax分别为0.0830、0.2634、1.1658 h，温度提高加快了克氏原螯虾中恩诺沙星的吸收。消除半衰期T1/2β大小顺序为肝胰腺（55.7403 h）>肌肉（52.7437 h）>血浆（18.6087 h）。以恩诺沙星和环丙沙星作为残留标志物，25℃时恩诺沙星在肝胰腺的消除期为311.47 h，18℃时恩诺沙星在肝胰腺的消除期为417.77 h，根据本试验结果，以国家标准0.2 μg/g为残留标准，建议恩诺沙星休药期为325（℃·d）。
2020, 39(2):40-46.
摘要:为揭示白斑综合征病毒（white spot syndrome virus，WSSV）感染克氏原螯虾(Procambarus clarkii)后对其肠道菌群的影响，运用16S rDNA基因的高通量测序技术分析健康与人工感染WSSV的克氏原螯虾的肠道菌群的组成及多样性。结果显示，感染组与对照组在肠道丰度及多样性无显著差异，但其优势菌群组成发生变化。对照组优势菌门为变形菌门（Proteobacteria）和软壁菌门（Tenericute），分别占75.42%和19.17%；感染组肠道优势菌门为变形菌门和拟杆菌门（Bacteroidetes）,分别占78.14%和17.38％。利用LEfSe分析差异菌属发现，感染组与对照组相比，Candidatus bacilloplasma丰度显著减少(P＜0.05)，拟杆菌科（Bacteroidaceae）和黄杆菌科（Flavobacteria）的丰度显著上升(P＜0.05)。此外，部分潜在病原菌如黄杆菌属（Flavobacterium）、气单胞菌属（Aeromonas）的丰度在感染后显著升高(P＜0.05)。以上结果说明WSSV感染导致克氏原螯虾肠道菌群发生变化，提示WSSV或可通过干扰肠道稳态致病。
2017, 36(2):96-101.
摘要:利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25基因的部分基因序列，并将扩增产物连接到原核表达载体Pgex-KG，成功构建了CyHV-2 ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后，SDS-PAGE分析表明：目的蛋白得到表达，分子质量大小为42 ku，且主要以包涵体形式存在；用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠，多次免疫后通过细胞融合，筛选出1株单抗5C6；经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证，这株单抗可以识别CyHV-2 ORF25蛋白。
2014, 33(03):65-71.
摘要:根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）气溶素（aerolysin,Aer）基因的序列设计引物，以来自湖北的鱼源A.hydrophila分离株为模板扩增出aer基因的ORF序列，克隆到pMD18-T载体上进行序列测定。测序结果表明，A.hydrophila的aer基因的系统进化树中国内菌株聚为一支，国外菌株聚为一支。通过pET-32a（+）载体构建Ah15株aer基因的表达载体pET32a-15，转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS中进行诱导表达，通过SDS-PAGE分析，显示与预期大小约72.2 ku相吻合的融合蛋白带，且以包涵体形式存在。浓缩后的包涵体蛋白免疫新西兰大白兔获得了重组蛋白的抗血清，Western blot结果显示，兔抗血清可以识别A.hydrophila的重组毒素，说明该基因的重组蛋白具有很好的免疫原性，可作为A.hydrophila基因工程疫苗研制的候选基因。
2013, 32(1):92-96.DOI: 1000-2421（2013）01-0092-05
摘要:针对国内市场上流通的金鱼，开展CyHV-2的流行病学调查，并比较CyHV-2不同分离株的分子特征。结果显示：无明显临床症状的金鱼带毒率较高（13.89%），表明我国已有CyHV-2的分布。分子生物学研究显示，我国金鱼和异育银鲫来源的CyHV-2编码的解旋酶基因部分序列一致，表明异育银鲫来源的CyHV-2和金鱼来源的CyHV-2极可能为同一种病毒。同日本分离株（H.Fukuda）比较，我国金鱼来源的CyHV-2编码的DNA聚合酶基因片段序列同该毒株完全一致，但两者编码的衣壳体间三联蛋白和解旋酶各有1~2个氨基酸的差异，表明我国分布的CyHV-2同H.Fukuda毒株高度相似，但存在一定的差异。
2013, 32(4):100-105.DOI: 1000-2421（2013）04-0100-06
摘要:以感染锦鲤疱疹病毒的患病鱼为材料，通过RT-PCR克隆ORF134的编码序列，在细胞水平分析其表达模式，并在原核表达系统中表达，获得可溶性的ORF134重组蛋白。结果表明ORF134在锦鲤疱疹病毒裂解感染中转录，证实ORF134为非结构功能基因。ORF134全长为624 bp，含有1个内含子，编码179个氨基酸，序列分析显示ORF134同已报道的高等脊椎动物病毒编码的vIL-10具有较低的序列同源性，但具有较高的结构相似性。体外表达分析显示ORF134呈分泌性表达，但不能形成寡聚体，与其他病毒编码的vIL-10具有差异。进一步通过原核表达获得可溶性的ORF134重组蛋白。