录用日期: 2024-11-06
摘要:
为了提高香蕉线条病毒复合感染的诊断效率,以香蕉线条病毒OL(banana streak OL virus,BSOLV)、香蕉线条病毒GF(banana streak GF virus,BSGFV)和香蕉线条病毒IM(banana streak IM virus,BSIMV)为检测对象,分别根据BSOLV 和BSGFV的外壳蛋白基因(coat protein,CP)基因以及BSIMV的RNase H基因的保守序列设计特异性引物,以BSV多克隆抗血清捕捉BSV为模板,通过不同引物浓度,退火温度等条件的优化,建立了能够同时检测BSOLV,BSGFV,BSIMV的多重免疫捕捉PCR方法。研究结果表明,当BSOLV、BSGFV和BSIMV上下游引物浓度分别为0.5μM,退火温度为62.9℃时,建立的多重免疫捕捉PCR方法可以从1mg/mL 的香蕉粗汁液中分别检测出BSOLV、BSGFV和BSIMV。所建立的多重免疫捕捉PCR方法具有良好的特异性,与引起相似症状的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus, CMV)无交叉反应。这些研究结果表明,该多重免疫捕捉PCR方法具有较高的敏感性和特异性,可以应用于香蕉种苗以及田间香蕉样品中三种BSV的检测。