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周向珍,朱辉.百脉根根瘤菌MAFF303099 Tn5转座子插入突变体库的构建及筛选[J].华中农业大学学报,2018,37(2):16-22
百脉根根瘤菌MAFF303099 Tn5转座子插入突变体库的构建及筛选
Constructing and screening a Tn5 transposon inserted mutant library of Mesorhizobium loti MAFF303099
投稿时间:2017-05-25  
DOI:
中文关键词:  Mesorhizobium loti MAFF303099  Tn5转座子  突变体  nodB
英文关键词:Mesorhizobium loti MAFF303099  Tn5 transposon  mutant  nodB
基金项目:中央高校基本科研业务费专项(2662015PY230);国家科技基础性工作专项(2015FY110700-S3)
作者单位E-mail
周向珍 华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室武汉 430070 xiangzhen711@sina.com 
朱辉 华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室武汉 430070 zhuhui@mail.hzau.edu.cn 
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中文摘要:
      以百脉根根瘤菌MAFF303099为材料,利用转座子Tn5-sacB转座技术得到了约10000个MAFF303099的转座接合子,构建随机插入突变体库进行保藏;同时建立了一套能从突变体库中快速筛选突变菌株的方法,且鉴定到共同结瘤基因nodB的突变体。结果表明:组成突变体库的接合子基因组中均有Tn5-sacB插入,三亲本转化效率为3.75×10-5;与野生型相比,MAFF303099 nodB的突变体在表型上不能使其宿主百脉根形成根瘤。
英文摘要:
      Mesorhizobium loti MAFF303099 was used to construct a random mutant library with transposon Tn5-sacB mutagenesis technique.A total of about 10000 independent mutants were obtained.A method for rapidly identifying mutants from the library was established.The mutant of the symbiotic nodule gene nodB was identified through screening the mutant library.The results showed that the transposon Tn5-sacB was inserted into the genome DNA of all the mutants in the mutant library,with the tri-parental mating transformation efficiency of 3.75×10-5.The MAFF303099 mutant of nodB did not form nodules on Lotus japonicus roots comparing with the wildtype.
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