Streptomyces sahachiroi ATCC 33158中一个Ⅲ型聚酮合酶基因的克隆及功能分析
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国家自然科学基金项目(30800020,30970059)、教育部留学回国人员科研启动基金项目(\[2009\] 1590)、教育部新世纪人才支持计划项目(NCET-08-0779)和中央高校基本科研业务费专项(2009PY006)


Cloning and functional analyses of a putative type Ⅲ polyketide synthase gene from Streptomyces sahachiroi ATCC 33158
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    摘要:

    从链霉菌Streptomyces sahachiroi ATCC 33158基因组中克隆到1个聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因orf18。生物信息学及进化树分析表明它可能属于rppA类Ⅲ型PKS基因。通过RT-PCR证实了该基因在野生型S.sahachiroi中是可以进行转录表达的。HPLC和LC-MS分析的结果表明orf18在S.lividans中异源表达时可产生1,3,6,8-四羟基萘(THN),并且发现该基因也可以在革兰氏阴性菌Pseudomonas stutzeri中异源表达并产生明显的棕红色色素。证明orf18编码的蛋白属于RppA类Ⅲ型PKS,可催化THN的合成,而产物THN在革兰氏阴性菌P.stutzeri中可进一步氧化及聚合形成棕红色色素。

    Abstract:

    A putative type Ⅲ polyketide synthase (PKS) gene orf18 found in genome sequence of Streptomyces sahachiroi ATCC 33158 was cloned and analyzed functionally.Bioinformatics and phylogenetic analyses revealed that orf18 was highly homologous to rppA-like type Ⅲ PKS gene.RT-PCR result demonstrated that orf18 can be transcribed into mRNA in wild-type S.sahachiroi.HPLC and LC-MS analyses verified that Orf18 catalyzes the 1,3,6,8-tetrahydroxynaphthalene (THN) biosynthesis by heterologously expressing in S.lividans.Moreover,brownish red pigments could be produced by heterologous expression of orf18 in Gram-negative bacteria Pseudomonas stutzeri.Experimental results demonstrated that Orf18 belongs to the RppA-like type Ⅲ PKS family and catalyzes THN formation,which could be further oxidized and then polymerized to produce red pigments.

    参考文献
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引用本文

强慧玲,原海亮,何璟. Streptomyces sahachiroi ATCC 33158中一个Ⅲ型聚酮合酶基因的克隆及功能分析[J].华中农业大学学报,2013,32(6):13-20

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  • 收稿日期:2012-07-28
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