摘要:原生质体制备与融合是重要的细胞工程技术,有利于实现远缘遗传物质的直接交换,促进遗传资源创新。本试验用Olympus BHS显微镜观察了曲霉原生质体融合全过程;采用淀粉-麸皮-硫铵培养基、淀粉-麸皮-豆粕培养基、马铃薯蔗糖琼脂培养基(PDA)等研究曲霉融合子及亲株产淀粉酶能力的特点;比较分析了亲株和融合子产淀粉酶性能与温度稳定性;比较研究了曲霉亲株和融合子淀粉酶的淀粉-聚丙烯酰胺非变性垂直平板凝胶电泳特征和各菌株可溶性蛋白质的淀粉-聚丙烯酰胺凝胶电泳特征。结果表明:曲霉原生质体融合过程很快,整个融合过程在5 min之内完成;融合子及亲株产淀粉酶随培养基、培养时间不同而变化;F05融合子在淀粉-麸皮-豆粕培养基产酶水平达(61 111.42±123.30)U/g,比亲株M70和M4分别高204.81%和114.00%,耐高温性能也有所提高;2种电泳结果都能够特异性显示淀粉酶带、重复性好。可见,原生质体融合是改良曲霉淀粉酶的有效方法。