增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化
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Q786

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国家自然科学基金项目 (3 9970 5 5 9)资助


The Expression and Purification of Enhanced Green Fluorescent Protein mutant mut4EGFP in E.coli
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    增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP(EGFP/V163A/S175G)是一种发光能力更强、更稳定的新型绿色荧光蛋白。为了获得大量高纯度的蛋白,将mUT4EGFP基因插入原核表达载体pTWINl中,使之与几丁质结合域(CBD)-内含肽(intein)融合,获得原核表达质粒pTWIN-M4。将pTWIN-M4转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,CBD-intein-mut4EGFP融合蛋白在BL21(DE3)plysS中获得高效表达并以可溶性蛋白的形式存在。进一步采用几丁质柱纯化系统对表达产物进行纯化,得到了高纯度的mut4EGFP.

    Abstract:

    mut4EGFP, a novel enhanced green fluorescent protei nmutant (EGFP/V163A/S175G), is more bright and stable than EGFP. In orde r to obtain the purified protein, the DNA fragment encoding mut4EGFP was inserte d into prokaryotic expression vector pTWIN1, resu

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引用本文

牛传双 方六荣 肖少波 张辉 陈焕春.增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化[J].华中农业大学学报,2004,23(5):

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