进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定
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中图分类号:

S943

基金项目:

中华人民共和国质量监督检验检疫总局资助项目 (批号 :K0 0 9-2 0 0 0 )


Study on the Aetiology of Koi Epizootic Disease Using the Method of nested-Polymerase Chain Reaction Assay (nested-PCR)
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    摘要:

    为了查明锦鲤暴发性疾病的病因,将患病锦鲤的脑,肝,脾和肾等组织悬液接种到CO,CK和EPS等鱼类细胞系中培养,均未发现细胞病变,从病灶中取样进行病原菌的分离和培养,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染,制备锦鲤疱疹病毒(KHV)的2对引物KHV9/5F和KHV9/5R,KHV1和KHV2,用嵌套式聚合酶链式反应(nested-PCR)在脑和脾脏组织的抽提物中扩增出长度为412bp的特异性的DNA片段,将该片段的nested-PCR拉增产物纯化后,克隆,测序,用NCBI-Blast软件将测序结果,在Genebank中进行搜寻,比较,结果发现与注册号为AF411803的KHV基因序列的一部分片段有99%的同源性,因此初步判断这次锦鲤暴发性疾病是由KHV引起的,副溶血弧菌和嗜水气单胞菌起着继发感染的作用。

    Abstract:

    In April, 2002, an outbreak of imported koi occurred in a farm in Guangdong Province with the mortality of 80% upward. In order to investigate the aetiology, the suspension of brain, kidney, spleen and liver were inoculated into fish cell lines of CO,

    参考文献
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    引证文献
引用本文

刘荭,史秀杰,高隆英,江育林.进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定[J].华中农业大学学报,2002,21(5):

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