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    • 黄颡鱼硒蛋白基因的克隆与分析

      2024, 43(1):185-193.DOI: 10.13300/j.cnki.hnlkxb.2024.01.021

      关键词:硒蛋白基因克隆分子特征黄颡鱼组织表达
      摘要 (426)HTML (182)PDF 1.87 M (811)收藏

      摘要:为探讨黄颡鱼硒蛋白selenow2a、selenop2和selenot2基因之间的关系,采用3′/5′ RACE PCR克隆得到3个基因的cDNA全长,分别为891、1 998和1 432 bp,其中ORF长度分别为288、828和600 bp,编码95、275和219个氨基酸。在线工具SECISerach3对3个基因的cDNA序列分析结果显示,它们都含有可以编码硒代半胱氨酸的终止密码子,以及在3′非编码区存在SECIS元件。通过氨基酸序列比对和系统发育树分析,发现selenow2a、selenop2和selenot2基因预测得到的氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)氨基酸相似性分别为82.24%、66.19%和79.45%,而与斑点叉尾鮰(Ictalurus punetaus)的氨基酸相似性分别为94.74%、68.50%和90.95%,在发育树上则显示为树杈相接近。采用实时荧光定量PCR检测3个硒蛋白基因的mRNA在黄颡鱼心脏、肝脏、肌肉、脑、肠、脾脏、精巢和卵巢组织中的表达,结果显示其mRNA表达水平呈现组织特异性。表明3个基因拥有硒蛋白家族的特征,但在组织表达上具有特异性。

    • 黄颡鱼朗格汉斯细胞的鉴定及其功能基因的表达分析

      2020, 39(6):173-179.

      关键词:黄颡鱼; 朗格汉斯细胞; 鲶爱德华氏菌; 荧光定量PCR; 基因表达; 超微结构; 免疫反应; 免疫组化
      摘要 (590)HTML (0)PDF 5.53 M (1222)收藏

      摘要:为研究黄颡鱼朗格汉斯细胞的结构特点以及细菌感染对其功能相关基因表达的影响,采用免疫组化技术对黄颡鱼免疫器官中朗格汉斯细胞进行鉴定,通过透射电镜进一步观察到黄颡鱼朗格汉斯细胞的超微结构,并采用荧光定量PCR检测鲶爱德华氏菌感染后黄颡鱼免疫相关组织内朗格汉斯细胞功能相关基因IL-1β、TNF-α、IL-10和TLR-4的表达情况。结果显示,黄颡鱼头肾和脾脏中具有朗格汉斯细胞的特异性分子标记CD207蛋白,且黄颡鱼朗格汉斯细胞的结构与其他脊椎动物类似,即细胞质中大量的伯贝克颗粒围绕着中心粒呈放射状排列。在鲶爱德华氏菌感染后,朗格汉斯细胞功能相关基因IL-1β、TNF-α、IL-10和TLR-4在黄颡鱼免疫器官内的表达量显著上调。上述结果表明,黄颡鱼含有朗格汉斯细胞,并且其可能参与了机体抗鲶爱德华氏菌感染的免疫反应。

    • 亮氨酸对秋繁时黄颡鱼精子活力的影响

      2019, 38(4).

      关键词:亮氨酸; 黄颡鱼; 秋繁; 精子活力; 受精率
      摘要 (940)HTML (0)PDF 1.04 M (1862)收藏

      摘要:在黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)精卵质量较差的秋繁早期,挑选体质量接近100 g的雄性黄颡鱼并分为3组,分别注射生理盐水(对照组)、100 μmol/L亮氨酸(亮氨酸适量处理组)和1 000 μmol/L亮氨酸(亮氨酸高浓度处理组),剂量均为200 μL,研究亮氨酸对秋繁时黄颡鱼精子活力的影响。通过计算机辅助精子分析(CASA)系统检测精子活力,发现亮氨酸适量处理组的精子活力衰退速度减小,精子运动时间提高。将3组黄颡鱼精子用于人工繁殖,发现亮氨酸适量处理组受精率为34.9%±4.7%,相比对照组的15.9%±2.2%有显著性提高;亮氨酸高浓度处理组精子的受精率为16.4%±3.4%,与对照组相比无明显变化(P<0.05)。结果表明适量的亮氨酸能提高黄颡鱼精子活力,但过量的亮氨酸并不能提高精子的繁殖能力。在黄颡鱼秋繁生产上可以适度添加亮氨酸以提高受精率。

    • 黄颡鱼bmp2a与bmp4基因启动子的克隆及分析

      2019, 38(1):91-96.

      关键词:黄颡鱼; 骨形态形成蛋白; 启动子; 转录因子
      摘要 (1341)HTML (0)PDF 980.50 K (1805)收藏

      摘要:为研究黄颡鱼bmp2a与bmp4基因的功能及其相关转录因子的调控网络,采用RLM5′ RACE方法确定bmp2a与bmp4基因的转录起始位点,通过hiTAILPCR方法克隆bmp2a与bmp4基因启动子序列并运用生物信息学方法预测启动子序列上的关键转录因子结合位点。结果显示,bmp2a与bmp4基因的转录起始位点分别位于bmp2a与bmp4基因编码区上游的391 bp与351 bp处。克隆bmp2a与bmp4的1 830 bp、1 962 bp启动子序列,在启动子序列的基础上预测出AP1、SP1、Ebox、GATA1、CREB、PPARγ、SOX5、SOX6和SOX9等转录因子的结合位点,提示这些转录因子对bmp2a与bmp4基因的转录调控发挥潜在的重要作用。

    • 黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼及“黄优1号”肌肉营养成分比较

      2018, 37(2):76-82.

      关键词:氨基酸; 脂肪酸; 黄颡鱼; 肌肉营养成分
      摘要 (2213)HTML (0)PDF 956.95 K (4043)收藏

      摘要:为科学评价生长速度快、抗病能力强的新兴养殖品种“黄优1号”(Pelteobagrus vachelli♀×Pelteobagrus fulvidraco♂)肌肉营养价值,测定其肌肉中常规营养成分、氨基酸和脂肪酸的含量和组成,并与其父本瓦氏黄颡鱼和母本黄颡鱼进行了比较。结果发现:黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼和“黄优1号”肌肉中共检测出17种氨基酸,在总氨基酸含量、总必需氨基酸含量以及总鲜味氨基酸含量等方面均以“黄优1号”肌肉中含量最高。“黄优1号”肌肉中富含人体必需脂肪酸,含量高达22.85%,与其母本黄颡鱼肌肉中必需脂肪酸含量接近,略低于其父本瓦氏黄颡鱼肌肉中必需脂肪酸含量。结果表明“黄优1号”具有较为显著的氨基酸和脂肪酸营养价值的双重优势。

    • 黄颡鱼仔稚鱼对缝隙和水层的栖息选择行为

      2017, 36(1):98-102.

      关键词:黄颡鱼; 藏匿行为; 缝隙; 水层; 仔稚鱼
      摘要 (1354)HTML (0)PDF 1010.03 K (2635)收藏

      摘要:采用室内模拟实验方法,观察黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)仔稚鱼对缝隙和水层的栖息选择行为。结果表明:1~18 日龄仔稚鱼表现出明显的藏匿行为,喜好栖息于缝隙场所,且白天的喜好性显著高于夜间;19~25日龄稚鱼则不选择缝隙场所栖息。2~7日龄仔鱼对0.3 cm缝隙的喜好性显著高于0.5 cm缝隙;9~18日龄仔稚鱼只选择较宽(0.5 cm)缝隙栖息。18 日龄以前,仔稚鱼白天选择栖息于底层缝隙(水底以上20 cm内)的比例显著高于表层缝隙(水面以下20 cm内);夜间,13~18日龄稚鱼栖息于表、底层缝隙的比例无显著差异。3~10日龄仔鱼及21~32日龄稚鱼喜好栖息于底层水体(水底以上20 cm内),11~20日龄仔稚鱼栖息水层未表现出显著的喜好性,表、底水层均有分布。

    • 水雍菜浮床养殖模式下黄颡鱼肠道菌群结构分析

      2016, 35(2):69-76.

      关键词:黄颡鱼; 肠道; 水雍菜; 人工浮床; 菌群结构; 高通量测序
      摘要 (1180)HTML (0)PDF 1.80 M (3491)收藏

      摘要:通过大规模养殖试验,研究人工浮床水培水雍菜对鱼塘养殖废水中氮磷的去除能力,并采用高通量测序方法研究养殖前后和不同处理组黄颡鱼肠道的微生物菌群结构,并分析了它们之间的相关性。结果表明:人工浮床水培水雍菜对鱼塘养殖废水中氨氮、总氮和总磷有良好的去除作用。养殖前后黄颡鱼肠道细菌多样性有明显差异;不同处理组之间的黄颡鱼肠道细菌种类多样性存在一定的差异,但优势菌群的组成并没有明显的结构差异,优势菌种的构成相似。在养殖前期黄颡鱼肠道中变形菌门(88.56%)占主要优势,末期对照组(无浮床)以厚壁菌门(48.4%)、梭杆菌门(32.52%)和变形菌门(14.56%)为主,试验组(有浮床)以变形菌门(36.72%)、厚壁菌门(21.89%)、梭杆菌门(17.48%)和拟杆菌门(11.48%)为主。

    • 黄颡鱼源柱状黄杆菌的分离鉴定及其对翘嘴鳜的致病性

      2016, 35(2):83-89.

      关键词:柱状黄杆菌; 黄颡鱼; 翘嘴鳜; 致病性; 组织病理
      摘要 (1478)HTML (0)PDF 11.93 M (2919)收藏

      摘要:从患病黄颡鱼上分离出1株柱状黄杆菌(Pf1),对其进行分类鉴定和药物敏感试验。用Pf1感染黄颡鱼和翘嘴鳜,发现Pf1对2种鱼均有致病性。Pf1可导致翘嘴鳜多个组织细胞坏死和炎症反应,严重损伤肝、体肾和鳃。被感染翘嘴鳜肝细胞肿胀、空泡化坏死;肾小管广泛坏死和大量炎症细胞浸润;鳃小片毛细血管充血,呼吸上皮细胞肿胀变性,鳃的呼吸功能衰退。鳃部病变导致感染鳜呼吸频率加快、游动缓慢,最后大量死亡。

    • 黄颡鱼性腺分化及温度对性别分化的影响

      2016, 35(1):106-113.

      关键词:黄颡鱼; 性腺分化; 温度; 性比
      摘要 (2069)HTML (0)PDF 9.60 M (3062)收藏

      摘要:采用组织切片法研究黄颡鱼的性腺分化并观察温度对性别分化的影响。结果发现,(27±1) ℃(中温组)条件下, 15日龄(全长(13.99±0.24) mm)黄颡鱼性腺开始分化,具有裂隙(即卵巢腔)的原始性腺未来发育为卵巢,而不具裂隙的原始性腺未来发育为精巢;精小叶和输精管最早出现于60日龄(全长(47.58±1.74) mm),雌性生殖细胞的发育及分化显著早于雄性。(32±1) ℃条件下(高温组)仔鱼性腺分化比中温组早5~10 d,(22±1)℃(低温组)仔鱼发育缓慢,性腺分化比中温组晚25~30 d。中温组和低温组幼鱼雌雄比接近1∶1(分别为1∶0.96和1∶1.17);高温组幼鱼雌雄比例为1∶2.09,雄性率为(67.70±0.54)%。高温条件((32±1)℃)使性腺发育趋向雄性。

    • 黄颡鱼DMRT1基因cDNA全长克隆及其表达分析

      2012, 31(2):220-226.DOI: 1000-2421(2012)02-0220-07

      关键词:黄颡鱼; DMRT1基因; cDNA末端快速扩增(RACE); 基因克隆; 荧光定量; 表达分析
      摘要 (1200)HTML (0)PDF 1.48 M (3043)收藏

      摘要:利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆了黄颡鱼DMRT1基因cDNA全长序列,并利用实时荧光定量RT-PCR技术对该基因在黄颡鱼成体不同组织及不同发育阶段的表达情况进行研究。结果表明,黄颡鱼DMRT1基因cDNA序列全长1 381 bp,其中5′端非翻译区30 bp,3′端非翻译区454 bp[不包括poly(A)],开放阅读框885 bp,编码295个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,黄颡鱼DMRT1基因与革胡子鲶同源性最高(为81%),与黑鲷、虹鳟、斑马鱼、青鳉的同源性分别为60%、59%、64%和52%,与小鼠、人的同源性较低,分别为42%和44%。实时荧光定量RT-PCR分析表明:DMRT1基因在黄颡鱼胚胎发育阶段及胚后发育的1~51 d仔鱼均有表达,且在胚后发育的第31天表达量最高;在成体,只在雄性精巢中特异性表达,其他组织均无表达,且性腺发育阶段的Ⅳ期精巢表达量最高,表明该基因可能在黄颡鱼雄性性腺的形成或功能维持上具有重要作用。

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