摘要:为在体内研究古菌核苷酸切除修复（nucleotide excision repair,NER）机制，利用基因敲除的方法，对泉古菌核苷酸切除修复机制进行研究，构建了冰岛硫化叶菌编码真核生物NER解旋酶XPB同源蛋白的基因xpb1和xpb2单缺失突变体，从而在体内分析xpb1和xpb2基因的功能。结果表明：基因xpb1或xpb2不是冰岛硫化叶菌存活的必需基因。表型分析发现，xpb1和xpb2基因单缺失突变体相较野生型菌株REY15A，对DNA损伤试剂4-NQO 4-硝基喹啉-1-氧化物（4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO）分别表现出轻微敏感性和不敏感性，暗示NER解旋酶功能在冰岛硫化叶菌体内存在多重冗余。

摘要:利用araS启动子并在穿梭载体pZC1及pEXA的基础上构建硫化叶菌超表达载体pZC2，成功超表达了带有C端6×His标签序列的DNA双链断裂修复蛋白Mre11，进一步采用共纯化法鉴定到Mre11蛋白的作用配体Rad50，确定上述蛋白在高浓度盐（500 mmol/L NaCl）中仍能形成MR复合体，表明该复合物在逆性条件下可能仍保持DNA断链修复的功能。进一步共纯化分析表明，基因组DNA片段是MR复合体形成的必需条件，在缺乏基因组DNA片段的情况下古菌分子伴侣蛋白结合并可能保护Mre11,该表达系统能够有效地应用于鉴定蛋白质的体内作用网络。