摘要:在前期研究中，采用RNA-seq技术获得了在水稻纹枯病菌菌核发育过程中差异表达的6个自噬相关基因，为阐明这些基因在水稻纹枯病菌菌核发育过程中的表达模式，提取了菌核发育过程中3个阶段的RNA，根据特异基因的序列设计引物，采用实时荧光定量PCR技术分析这些基因的表达谱。结果表明，丝氨酸/苏氨酸激酶和ssp1、ATG13和Vam6基因的表达量在白色菌核形成阶段的表达量显著升高，而在菌核发育成熟阶段的表达量明显下降。而丝氨酸/苏氨酸-蛋白磷酸酶基因和丝氨酸/苏氨酸激酶受体相关蛋白基因的表达量在菌核发育阶段呈现出连续下降的趋势。研究发现这6个与细胞自噬有关的基因的表达谱与转录组测序的结果一致，表明转录组测序的结果可靠；同时也表明了这些基因高度响应了菌核的发育过程。

摘要:为全面了解草鱼MHC I区基因及其表达特征，利用已知斑马鱼MHC I区基因序列，通过本地Blast得到草鱼MHC I区的部分基因序列。采用RT-PCR技术，检测MHC I区BRD2、KNSL2、RXRB、TAPBP、FABGL、MHC Ia、PSMB9以及TAP2等8个基因在健康草鱼各组织的表达水平。结果表明，除FABGL在肾脏表达量最高外，其他基因都在血液中的表达量最高。通过实时荧光定量PCR检测草鱼在嗜水气单孢菌感染后4、12、24、48及96 h，MHC I区免疫相关基因在脾脏和肾脏中的表达情况。结果发现，BRD2表达量分别在12 h和24 h在肾脏和脾脏中达到最高；MHC Ia表达量在脾脏和肾脏中都先上升后下降，并都在24 h达最大值；PSMB9表达量在脾脏先上升后下降，在12 h达最大值，在肾脏中则先下降后上升，在24 h达最大值；TAP2在脾脏和肾脏中整体呈先下降后上升的趋势，在24 h都达最大值，并最后都回调至正常范围。BRD2、MHC Ia、PSMB9、TAP2的表达量在攻毒后都有显著性变化，表明这4个基因在草鱼免疫方面具有重要的作用。

摘要:以感染黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）的不同基因型香蕉分化芽为研究对象，利用肉眼观察、RT-PCR和实时定量荧光PCR方法研究CMV在不同感病香蕉分化芽中的症状及传递规律。结果表明，感染CMV的‘粤优抗一号’、‘威廉斯’、‘大蕉’和‘皇帝蕉’在组培过程的第1代至第12代病害症状均不明显。随着组培继代数增加，不同品种的组培苗中CMV含量变化虽然不同，但均在顶部第1~2叶中含量最高。因此，检测香蕉分化芽中CMV最佳材料为顶部叶片。

摘要:通过 RT-PCR 技术克隆欧洲鳗鲡（Anguilla anguilla）Ig轻链基因cDNA全长序列，命名为AaIgL，其全长为1 016 bp，开放阅读框为714 bp，编码238个氨基酸。将该基因片段与 pET-his 载体连接构建原核表达载体，在大肠杆菌 BL21 中诱导表达，其表达产物经 SDS-PAGE 和 Western blotting 分析，结果表明新增的 27 ku 蛋白条带与预期值相符，且与兔抗欧洲鳗鲡 IgM 血清发生特异性显色反应，证实了AaIgL基因能够在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达；实时荧光定量PCR检测结果发现：AaIgL在欧洲鳗鲡各组织中均有表达，其中脾脏的表达量最高，肾脏和心脏中也有较高的表达水平，而肝脏、肌肉、鳃以及肠中的表达量较低；欧洲鳗鲡经山羊IgG肌肉注射后脾脏和肾脏的AaIgL表达水平明显上升，其峰值分别为第7天和第14天， AaIgL在脾脏的表达量显著高于肾脏，但是第21天后均恢复至正常水平。以上结果表明，AaIgL在欧洲鳗鲡机体免疫防御中发挥重要作用，脾脏是AaIgL基因的主要表达器官。

摘要:为探讨CaNAα在生长速度差异较大的2个品种鸡生长发育早期不同表型肌肉中的表达规律，利用实时荧光定量PCR技术检测清远麻鸡（慢生型）和隐性白羽鸡（速生型）3种表型肌肉（腓肠肌外侧头、比目鱼肌和趾长伸肌）CaNAα mRNA在0、1、3、5、7、9周龄时的表达情况。结果发现：除清远麻鸡比目鱼肌外，2个鸡品种中其他表型肌肉均呈现先上升后下降然后再上升的趋势；2个鸡品种趾长伸肌的表达量均在1周龄时最高，清远麻鸡7周龄时降至最低，而隐性白羽鸡5周龄时降至最低；腓肠肌外侧头和比目鱼肌CaNAα mRNA的表达峰值在清远麻鸡中出现在3周龄，而在隐性白羽鸡中则出现在9周龄；总体而言，CaNAα mRNA在比目鱼肌中的表达量要低于其在趾长伸肌和腓肠肌外侧头中的表达量；品种间比较发现，CaNAα mRNA在清远麻鸡3种表型肌肉的表达量在0和3周龄时均高于隐性白羽鸡，而在9周龄时则均低于隐性白羽鸡，3周龄时2个品种鸡差异倍数最高。研究结果提示，鸡肌肉CaNAα mRNA表达发育模式具有品种、年龄和表型特异性，并可能与鸡肉品质存在关联。

摘要:采用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法，得到黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）消化系统胰蛋白酶原基因cDNA，并且对其早期发育过程中仔稚鱼（1~3日龄）消化系统胰蛋白酶原基因表达进行检测和定量。结果表明，黄颡鱼消化系统中胰蛋白酶原的基因表达起始于1日龄，1~6日龄表达量快速增加、6~23日龄表达量呈起伏式增加、23~30日龄表达量显著增加。该结果同时表明使用实时荧光定量PCR的方法检测黄颡鱼胰蛋白酶原基因的表达量，能反映其肠道消化功能在发育过程中的变化。建议黄颡鱼仔稚鱼转饵时间在23日龄后。

摘要:利用RT-PCR和RACE方法克隆获得桔小实蝇Bactrocera dorsalis (Hendel) 二硫键异构酶（protein disulfide isomerase，PDI）基因的cDNA序列，命名为BdorPDI。测序结果表明，BdorPDI开放阅读框全长1 497 bp，编码498个氨基酸。氨基酸序列结构分析表明，该序列有PDI蛋白家族的典型特征：N端含有信号肽序列；在序列的N端及C端具有二硫键/巯基氧化还原位点CGHC；在C末端含有内质网滞留信号肽KDEL。进化树分析表明：桔小实蝇的PDI蛋白序列与脊椎动物安乐蜥（Anolis carolinensis）的序列（XP_003217370）一致性最低，为49.3%；与双翅目昆虫刺舌蝇（Glossina morsitans）的序列(ADD20271)一致性最高， 为76.3%。荧光定量PCR分析表明：BdorPDI mRNA在桔小实蝇1~3龄幼虫中的表达量相对较低，且呈逐渐增长的趋势； 在1 d蛹中的BdorPDI mRNA表达量达到最高峰，其表达量是基准含量的536.50倍，且随着蛹的发育，BdorPDI mRNA表达量呈逐渐降低的趋势。由此可见，桔小实蝇二硫键异构酶在化蛹过程中发挥了重要的生理功能。

摘要:克隆鲢转铁蛋白(transferrin,Tf)基因的全长cDNA序列，并对鲢转铁蛋白的组织表达模式、胚胎发育过程中的时序表达模式进行分析。结果显示，该cDNA全长2 365 bp，包含2 025 bp开放阅读框(ORF)，编码674个氨基酸。鲢转铁蛋白与草鱼转铁蛋白的同源性高达74%，与人乳铁蛋白同源性最低，为39%，与其他鲤科鱼类转铁蛋白的同源性约65%~73%,与非鲤科鱼类的同源性约43%~50%。系统进化树分析显示，鲢转铁蛋白基因与斑马鱼、草鱼、鲤、鲫等几种鲤科鱼类亲缘关系最近，单独聚为一支。鲢转铁蛋白基因仅在肝脏和脾脏中表达（肝脏中表达量高于脾脏）。在胚胎发育过程中，转铁蛋白基因对原肠中期后的器官分化和形态建成起到了一定的作用，而未影响原肠中期前的细胞分裂增殖。

摘要:采用RT-PCR和RACE技术，成功克隆了唐鱼（Tanichthys albonubes）热休克蛋白60基因cDNA全长序列，命名为TaHSP60（GenBank登录号：HM234132）。研究表明：该基因序列全长为2 486 bp，5′端非翻译区（URT）102 bp，3′URT 656 bp，开放阅读框（ORF）1 728 bp，编码575个氨基酸。序列比对分析表明唐鱼HSP60与斑马鱼（Danio rerio）的相似性高达96.2%，与鲫（Carassius auratus）、褐牙鲆（Paralichthys olivaceus）、大西洋鲑（Salmo salar）以及非洲爪蟾（Xenopus tropicalis）的相似性分别为93.2%、89.7%、88.3%和83.8%。Clustal X比对结果表明：该序列含有典型的mt-HSP60特征序列、ATP结合位点，以及C末端保守的重复区域GGM。进化分析结果表明，唐鱼HSP60与斑马鱼HSP60聚为一支，二者亲缘关系较近。荧光定量PCR显示唐鱼HSP60的mRNA在肝脏、肌肉、鳃、鳍条、眼睛、卵巢、肠道和脑等8种组织中均有表达，其中肝脏中表达量最高，而在鳃和鳍条呈微量表达。统计分析表明，其他各组织与肝脏相比均有显著差异。铜暴露后，唐鱼肝脏HSP70mRNA表达水平分别在48 h和96 h出现上调，均显著高于对照组。