摘要:为筛选在泥鳅中稳定表达的内参基因，以确保泥鳅基因表达分析结果的可靠性，选取ACTB、TUBA、EF1A、GAPDH、TUBB和18S rRNA 6个常用的内参基因作为候选内参基因，分别用BestKeeper、geNorm、NormFinder、ΔCt和RefFinfer软件分析这6个基因在二倍体和四倍体泥鳅胚胎发育阶段、成鱼组织间以及倍性间表达的稳定性。结果显示，在胚胎发育各阶段，TUBB和TUBA的表达最稳定，可作为胚胎发育阶段qRT-PCR分析的内参基因；其中，TUBB在泥鳅倍性间的表达差异不显著，因此，可作为泥鳅胚胎发育中跨倍性qRT-PCR研究的内参基因。在成鱼各组织中，ACTB和18S rRNA的表达最稳定，可用作组织间qRT-PCR分析的内参基因；其中，18S rRNA在倍性间的组织表达差异不显著，因此，可作为泥鳅组织间跨倍性qRT-PCR的内参基因。

摘要:为探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）基因在二倍体和四倍体泥鳅之间的表达差异及其与DNA甲基化的相关性，克隆二倍体、四倍体泥鳅的CDS序列和启动子序列，并分别采用qRT-PCR和亚硫酸氢盐测序技术（BSP）分析IGFBP-1在二倍体、四倍体泥鳅中的表达水平及启动子区和第一外显子区的甲基化水平。结果显示，泥鳅的IGFBP-1基因CDS序列长789 bp，编码262个氨基酸，二倍体、四倍体泥鳅间有5 bp的差异，但氨基酸序列完全相同。在二倍体、四倍体中分别克隆得到2 341 bp和2 331 bp的启动子序列，倍性间的序列相似度达99%，启动子序列中包含典型元件TATAbox，以及SP1、CREB、C/EBP、POU2F2、GATA2/3/4和SRY等转录因子结合位点。泥鳅的IGFBP-1基因主要在肝脏中表达，且四倍体泥鳅肝脏中IGFBP-1的表达水平显著高于二倍体（P＜0.01）。四倍体泥鳅IGFBP-1基因启动子及第一外显子区的甲基化水平均比二倍体低，其中四倍体肝脏中的甲基化水平显著低于二倍体（P＜0.01）。综合分析研究结果表明，在IGFBP-1基因主要表达的肝脏组织中，其mRNA表达水平与DNA甲基化水平呈负相关，启动子区较高的甲基化可能抑制了二倍体泥鳅IGFBP-1基因的表达。

摘要:试验以泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus,Ma）为研究对象，采用PCR技术克隆获得trim63a基因（tripartite motif containing 63，又名肌肉环状指基因1）的cDNA部分序列，生物信息学分析结果显示，Matrim63a基因cDNA的编码序列（coding sequence，CDs）为1 035 bp，编码344个氨基酸，与硬骨鱼类相似度较高。采用荧光定量PCR技术检测人工繁殖获得的二倍体（D×D）和四倍体（T×T）胚胎不同发育时期Matrim63a的表达量以及泥鳅二倍体（D）和四倍体（T）成鱼不同组织中Matrim63a的表达量，基因表达分析结果显示，Matrim63a在泥鳅二倍体和四倍体成鱼肌肉中的相对表达量最高，其次是心脏；Matrim63a在泥鳅二倍体和四倍体胚胎的13个发育时期均有表达，但是不同倍性的胚胎表达差异较大。

摘要:对大鳞副泥鳅（PP）、二倍体泥鳅（DD）和四倍体泥鳅（TT）自交或杂交受精卵进行冷休克(冷休克条件为：受精后5 min开始，利用2~3 ℃冰水冷休克处理30~35 min)，获得6种多倍体泥鳅后代（DD×PP-0，3n=74；DD×DD-0，3n=75；DD×TT-0，4n=100；TT×PP-0，5n=124；TT×DD-0，5n=125和TT×TT-0，6n=150。母本在前，父本在后）。利用流式细胞仪对不同诱导组合不同时期倍性进行检测发现：1月龄，DD×PP-0三倍体诱导成功率为87.50%，DD×DD-0三倍体诱导成功率为53.85%，DD×TT-0四倍体诱导成功率为90.91%，TT×PP-0五倍体诱导成功率为84.96%，TT×DD-0五倍体诱导成功率为76.92%，TT×TT-0六倍体诱导成功率为12.50%。12月龄，各组合多倍体诱导成功率分别为91.43% (DD×PP-0,3n=74)，60% (DD×DD-0,3n=75)，85.19% (DD×TT-0，4n=100)，87.50% (TT×PP-0，5n=124)，83.33% (TT×DD-0，5n=125)和6.06% (TT×TT-0，6n=150)。12月龄各诱导组合多倍体倍性组成与1月龄相似，诱导成功率随诱导多倍体后代的倍性增加而降低。对不同诱导组合后代进行生长统计分析发现：不同诱导组合后代在生长早期差异不显著，生长后期表现出不同程度的差异。其中，以四倍体泥鳅为母本、大鳞副泥鳅为父本的诱导五倍体后代（TT×PP-0）12月龄时期全长和体质量值最大。同时，荧光受精细胞学观察证实冷休克处理通过抑制受精卵第二极体的释放获得三倍体型后代。

摘要:采用形态学测定与统计分析相结合的方法，观察和测定泥鳅♀ × 大鳞副泥鳅♂（D×P）和大鳞副泥鳅♀ × 泥鳅♂（P×D）及其亲本的形态差异、可数性状及可量性状，研究泥鳅和大鳞副泥鳅杂交子代及其亲本的形态差异。结果显示，正反交子代（D×P和P×D）外观相似，同时具有双亲的一些特征，如尾柄处皮褶发达，与大鳞副泥鳅相似，而身体上的花纹与泥鳅更相似，大多为圆形斑点，兼有少部分条纹。在体型方面，2种杂交子代体型介于泥鳅和大鳞副泥鳅之间，较大鳞副泥鳅更圆。聚类分析和主成分分析显示， 2种杂交泥鳅形态相近，均与大鳞副泥鳅更相似。判别分析综合准确率达到94.1%，可以有效鉴别这2种泥鳅和它们的杂交种。泥鳅和大鳞副泥鳅正反交均可获得存活子代，且孵化率、畸形率和早期存活率与自交组没有显著性差异（P>0.05）。

摘要:为促进黄籽油菜的基因组研究和利用，构建了芥菜型油菜黄籽品种四川黄籽的高质量BAC文库。该文库由82 944个单克隆组成，被保存在216块384孔板中。质粒酶切检测结果表明，文库的平均插入片段大小约为140 kb，空载率约为2.5%，按照芥菜型油菜基因组1 000 Mb计算，文库覆盖度约为油菜基因组的11.6倍。BAC末端序列比对分析结果显示，克隆被均匀比对到芥菜型油菜的18条染色体上，并且无任何叶绿体、线粒体和细菌基因组DNA污染。

摘要:以NaCl胁迫星星草（Puccinellia tenuiflora）cDNA酵母文库为基础，在星星草中筛选和鉴定PutNaKR3基因，对PutNaKR3基因及其编码的氨基酸序列进行生物信息学、组织特异性表达和非生物胁迫应答表达分析。结果表明:星星草PutNaKR3基因具有组织表达特异性，在根和叶中的表达量明显高于其他组织;过表达PutNaKR3基因可增强酵母菌株在盐、碱、氧化和渗透胁迫下的生存能力，同时可提高酵母在部分金属胁迫下的适应能力。

摘要:通过盆栽方式进行水稻秸秆炭、水稻谷壳炭、果木木炭等3种生物质炭比较试验，每盆土壤15 kg，参照大田用量模式设置了5、10、20、40 t/hm2 4个秸秆炭水平，20、40 t/hm2 2个谷壳炭与木炭水平,研究不同处理对水稻生长及土壤养分的影响。结果表明，3种生物质炭在一定范围内都能促进水稻干物质积累和产量形成，以秸秆炭效果最好。不同秸秆炭施用量比较，干物质量和产量呈先增后降趋势，在20 t/hm2时达到最高，生物量较不施炭对照提高51.45%，谷粒产量增加72.55%。施用谷壳炭以40 t/hm2效果较好，产量提高60.52%。施用20 t/hm2木炭有提高地上部生物量与产量的作用，但增加至40 t/hm2则明显降低。适量施用生物质炭能够增加土壤中速效氮磷钾和总养分含量，以秸秆炭效果最好,谷壳炭次之,木炭最差。木炭的碳含量高达74.28%，过量施用显著降低土壤速效氮磷钾含量，对水稻生长不利。

摘要:采用SSR分子标记技术研究化州柚不同品系及柑橘属各代表种质间的亲缘关系，结果表明：25对SSR引物在15个样品中扩增得到175个等位基因，聚类分析证实化州柚与柚类亲缘关系较近，而且一些化州柚同名材料在遗传上存在差异。利用高效液相色谱（HPLC）法检测不同种质幼果及不同果径果实不同组织中柚皮苷含量，结果表明：化州柚幼果中柚皮苷含量显著高于化州本地柚光青及其他地区普通柚，且受年份和环境的影响较大；随着果径的增大，2个化州柚种质正毛（吴）和假西洋（吴）果皮及果肉中柚皮苷含量均呈现下降趋势，且果肉中柚皮苷含量比果皮中高。综合分析果实大小和有效成分含量得出，果实直径4~8 cm时是化州柚适宜采收期，果径6 cm左右为最适采果期。

摘要:为揭示梅花WRKY基因的功能，采用RTPCR技术从梅花品种‘雪梅’（Prunus mume ‘Xuemei’）中分离得到1个WRKY转录因子基因PmWRKY40。序列分析结果显示，该基因cDNA全长1 072 bp，完整开放阅读框972 bp，编码323个氨基酸，包含1个WRKY结构和1个C2H2型锌指结构。系统进化分析结果显示，梅花PmWRKY40蛋白与欧洲甜樱桃亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析表明：PmWRKY40基因受低温、氧化胁迫诱导，但诱导程度存在差异。此外，SA处理显著提高PmWRKY40的表达，ABA处理则抑制该基因表达。推测PmWRKY40可能在梅花响应低温胁迫过程中起重要作用。

摘要:基于液质联用(LCMS)的代谢组学分析手段，通过突变株Qnox1-6与野生株zs-1的代谢比较，研究NADPH氧化酶相关基因对盾壳霉代谢的影响。筛选得到14个重要的代谢差异物质，主要是羧酸类和苷类物质。特别是7个仅在突变株中出现的物质为：苯二酚、松柏苷、甾体皂苷类物质、3个羧酸类物质及其他物质，这些代谢物与盾壳霉寄生核盘菌紧密相关。

摘要:为实现糖多孢菌的体内转座诱变，采用刺糖多孢菌的强启动子促进Tn5转座酶基因tnp(5)的表达，优化链霉菌高效转座质粒pHL734，构建了转座质粒pJTn1、pJTn2、pJTn3、pJTn4、pJTn5、pJTn6。结果显示：pJTn1~pJTn6系列转座质粒均可在红色糖多孢菌中高效转座；pJTn1和pJTn5可在刺糖多孢菌中进行转座，获得31个刺糖多孢菌转座突变株；其中30个菌株的基因组中检测到标准的Tn5转座，8个突变株的多杀菌素产量显著降低。表明pJTn系列转座质粒可作为糖多孢菌的体内转座诱变工具，为抗生素的产量调控研究和高产育种靶标基因筛选提供理论依据。

摘要:为了揭示豆粕发酵过程真菌群落的变化情况，为发酵豆粕的稳定性和安全性评价提供依据，采用MiSeq高通量测序技术分别检测2批发酵豆粕在0、24、48 h时的真菌群落组成。结果表明：酵母菌属（Saccharomyces)是2批发酵豆粕在24 h和48 h时共有的唯一优势真菌属（相对丰度≥1%），它在发酵0 h时相对丰度均值不足1%，但在发酵24 h时的相对丰度均值为98.30%，48 h时的相对丰度均值为89.56%。并且在发酵豆粕中检测不到有害真菌，证明发酵豆粕具有很好的安全性。2批发酵豆粕在3个时间点的真菌群落变化具有相似性，酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的相对丰度先不断上升，然后维持在较高水平。在发酵过程中酿酒酵母不断消耗、钝化豆粕中的抗营养因子，并产生多种有益代谢产物，提高了发酵豆粕的品质。

摘要:为实现淡水鱼品种的快速鉴别，采用近红外光谱分析技术建立7种淡水鱼鲜肉的快速鉴别模型。试验采集了鲢、草鱼、乌鳢、鲫、鲤、青鱼、鳙7种淡水鱼共772个鲜鱼肉样品的近红外光谱数据，分别考察标准正态变换 (standard normalized variate,SNV)、多元散射校正 (multiplicative signal correction,MSC) 的预处理方法及核主成分分析 (kernel principal component analysis,KPCA) 和主成分分析(principal component analysis,PCA) 的特征提取方法对支持向量机(support vector machine,SVM)判别模型的影响。结果显示，经SNV预处理和KPCA提取特征变量后，对未知样品的整体正确判别率达到92.68%。因此，采用近红外光谱技术结合化学计量学方法所建SVM 模型可以实现淡水鱼品种的快速鉴别。

摘要:以4种酵母抽提物（KA66、FA28、KU012、FA01）为原料，通过分析其金属离子、游离氨基酸、总氨基酸和核苷酸的组成，以滋味活度值（TAV）和味精当量（EUC）为指标分别评价各滋味成分对酵母抽提物滋味的贡献程度和鲜味物质间的协同增鲜作用；并将其加入到鱼糜制品中，通过感官评价和电子鼻分析探究其对鱼糜制品风味的影响。结果表明，酵母抽提物KU012中谷氨酸、丙氨酸、5′IMP、5′GMP等滋味物质含量最高，TAV值最大，而FA01中丙氨酸、5′IMP、5′GMP含量最低，TAV值最小；FA28中总氨基酸含量最高，谷氨酸含量最高；KU012的EUC值最高，1 g KU012产生的鲜味强度相当于125.22 g单一味精（MSG）所产生的鲜味强度，为125.22 gMSG/g；感官结果表明，酵母抽提物可显著改善鱼糜制品的滋味，对腥味也有一定掩蔽作用，KU012感官评分最高；电子鼻的结果表明，加入不同的酵母抽提物后，鱼糜制品的挥发性成分区别较大。

摘要:以冷冻鱼糜为原料，添加谷氨酸钠和乙醇，通过测定菌落总数、挥发性盐基氮（TVB-N）值、pH、2硫代巴比妥酸（TBARS）值、结合色度（L*、a*、b*）、持水性和质构特性，探讨-22℃条件下在数次冻融循环中谷氨酸钠和乙醇的添加对鱼糜制品品质的影响。结果表明，谷氨酸钠和乙醇能提高鱼糜凝胶的持水性、白度和弹性，并且在冻融循环中能显著延缓持水性、白度和弹性的下降（P＜0.05）；随着冻融循环次数的增加，添加谷氨酸钠和乙醇的鱼糜凝胶的菌落总数、TVB-N值和TBARS值的上升速率显著低于空白组(P＜0.05)，且同时添加效果最佳；pH呈先降低后升高的趋势，同时添加波动幅度最小，说明谷氨酸钠和乙醇可以延缓鱼糜制品在冻藏过程的品质变化，且作用效果是谷氨酸钠和乙醇混合添加组最佳，谷氨酸钠组和乙醇组次之。

摘要:以鳙鱼肉为研究对象，测定-20℃下鳙鱼肉的肌原纤维、肌浆中的组织蛋白酶B及组织蛋白酶B+L活性、肌原纤维蛋白及肌浆蛋白的SDSPAGE条带以及扫描电镜和透射电镜下的肌原纤维显微结构、质构、持水力（汁液损失及LF-NMR数据）随贮藏时间的变化。结果显示：鳙鱼片在-20℃下冻藏不同时间后再解冻，其组织蛋白酶仍具有较高的活性，肌球蛋白重链、肌动蛋白、肌钙蛋白T及原肌球蛋白随着冻藏时间的延长而降解，且出现了有可能是组织蛋白酶L酶解产物的20 ku肌浆蛋白条带。扫描电镜及透射电镜的结果显示，在冻藏112 d，肌纤维遭到了严重破坏，肌节中的A带及I带已经不能被清楚地辨别出来，M线几乎消失，同时鳙鱼肉的硬度及弹性随冻藏时间延长而大幅下降。鳙鱼肉的汁液损失、水分的T21、T22、P22均随着冻藏时间延长而显著上升，水分的P21随冻藏时间延长而显著下降。研究结果表明，鳙鱼肉在冻藏过程中，组织蛋白酶B及B+L参与了肌原纤维蛋白及肌浆蛋白的降解，从而破坏了鱼肉肌纤维微结构的完整，并造成了鳙鱼肉质构及持水力的劣化。

摘要:青团是一种传统糯米制品，存在黏性较高和易塌陷等问题。在传统青团原料中添加葛根、红薯、小麦和大米等4种淀粉类原料，考察其对青团感官指标和质构特性的影响，利用Pearson法分析原料、质构指标与青团感官之间的相关性，二次旋转正交组合法得出青团的最佳配方。研究结果显示:质构指标对青团感官评分的影响大小顺序为：黏性＞硬度＞弹性＞咀嚼性；4种淀粉类原料对硬度指标呈极显著正相关(P＜0.01)；直链淀粉/总淀粉、直链淀粉/支链淀粉的比值可分别作为评价青团硬度（r=0.503，P＜0.05）、黏性（r=0.468，P＜0.05）的优选指标；感官评分最高的青团最优配方为，葛根粉17.1%、红薯粉5.0%、小麦粉10.0%、大米粉30.0%。研究结果表明，以糯米粉为基础添加富含直链淀粉的原料能改善青团感官品质。

摘要:采用溶剂挥发法制备柚皮素磷脂复合物，利用紫外光谱法、傅里叶变换红外光谱法、X射线衍射法对柚皮素磷脂复合物的结构进行表征，用差示扫描量热法对复合物的热特性进行分析，利用气相色谱法测定磷脂复合物的溶剂残留量，利用高效液相色谱法测定其在水、正辛醇、磷酸盐缓冲液（PBS）(pH值分别为2.5、5.0、6.5、7.0、7.8~8.0)中的平衡溶解度、油水分配系数以及体外溶出度。结果显示，在柚皮素质量浓度5 g/L、柚皮素与磷脂质量比1∶1.5、反应时间2 h、反应温度40℃的条件下，柚皮素磷脂复合物载药量为31.79%±0.99%。柚皮素磷脂复合物中二氯甲烷残留量为0.016 3%±0.002 5%，乙酸乙酯残留量为0.040 8%±0.001 9%，均符合药典标准。柚皮素磷脂复合物可显著提高柚皮素在水、正辛醇及不同pH下 PBS中的平衡溶解度，其油水分配系数对数值(logP)为1.11±0.09。体外溶出试验结果显示，柚皮素磷脂复合物溶出度明显增加，较易被人体吸收利用。

摘要:为满足长江中下游地区油菜和小麦播种要求、提高播种机作业效率、简化播种机结构并有效控制机械式排种方式的种子易破损和堵塞型孔等问题，设计一种无需清种与护种装置的油麦兼用斜锥型孔轮式集排器，提出一种油菜双圈、小麦三圈型孔交错排布以及斜锥形型孔结构。构建充种、携种、投种和输种等过程的力学模型，分别确定排种器充种时的最小充填高度比基准高度低10 mm、验证该集排器结构的合理性、得到油菜小麦型孔后倾角分别低于30°和15°时，油菜和小麦的最大投种角分别可达40.8°、34.4°以及油菜和小麦输种管与水平面夹角需不小于33°。正交试验结果显示，油菜型孔后倾角20°、充填高度为基准高度、转速20 r/min，小麦型孔后倾角5°、充填高度20 mm、转速15 r/min，油菜、小麦各行排量一致性变异系数分别低于6.00%、6.32%，总排量稳定性变异系数分别低于1.25%、1.00%，破损率均低于0.5%。田间试验表明，油菜、小麦播种试验出苗效果良好。

摘要:研制一种可一次性完成玉米根茬粉碎还田、起垄、施肥、精密播种联合作业的2BYML-4型玉米垄作免耕播种机，对其整机结构和工作原理进行了分析，通过理论计算确定了仿形机构、灭茬刀转速和控制系统的相关参数。田间试验结果显示:垄高、垄顶宽、垄间距合格率分别达到94.73%、90.64%和90.13%;粒距合格指数92.0%，标准差11.99，变异系数5.24%；漏播指数4%,重播指数 4%;种子覆土深度合格率为88.3%,种下施肥合格率为89.7%，变异系数分别为9.71%和10.32%。该机田间作业垄形规则，种、肥田间分布均匀合理，其结构参数和工作参数组合，更好地满足了旱地农业保护性耕作要求并有效改善生态环境。

摘要:以某锤片式饲料粉碎机转子系统架板为研究对象，采用ANSYS Workbench软件对其进行静力学计算与模态分析。结果显示:实际工况下架板的最大总形变量为0.035 mm，其发生在中间支撑板上装有8块锤片的2个销轴的安装孔处，架板沿X、Y及Z轴方向上的最大形变量分别为0.035、0.001以及0.016 mm，各形变量均较小且与架板实际受力情况相符；架板所受最大应力为165.72 MPa，且应力较大的部位仅集中分布在中间支撑板上装有8块锤片的2个销轴的安装孔附近，架板上绝大部分位置的应力值均在36.862 MPa以下；架板的一阶固有频率为339.79 Hz，且前六阶固有频率均远大于粉碎机的激振频率58.33 Hz，但其存在较大的材料冗余。基于此，对架板进行拓扑优化，并根据材料去除率为50%的计算结果对架板结构进行优化设计，优化后架板的质量由最初的46.66 kg降至25.85 kg。对优化后的架板进行静力学计算与模态分析，结果表明，全新的架板的强度与刚度均足够，且其材料冗余量大幅降低，架板在工作过程中不会发生共振。