摘要
为探究不同饮食模式对小鼠焦虑抑郁样行为的影响，采用慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictability mild stress，CUMS）模型，将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食组（normal diet，ND）、正常饮食应激组（normal diet stress，NDS）、高脂饮食组（high fat diet，HFD）和高脂饮食应激组（high fat diet stress，HFDS），对小鼠的行为、体质量、脂质和神经递质等指标进行测定。结果显示，与ND组相比，HFD组小鼠糖水偏好显著降低，旷场试验中总运动距离、进入中心区域次数和跨格次数降低，HFDS组部分行为学指标较HFD组更低，且HFDS组部分行为学指标低于NDS组；HFD组体质量、体脂比、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平最高，CUMS显著降低高脂饮食和正常饮食小鼠的体脂比、TC和TG水平，且与NDS组相比，这些脂质指标水平在HFDS组更低。结果表明，高脂饮食易诱导焦虑抑郁样行为，且高脂饮食会加重CUMS诱导的焦虑抑郁样行为，其机制可能与脂质代谢、中枢神经递质代谢途径有关。
慢性压力是一个普遍存在的社会健康问
雄性C57BL/6小鼠购于湖北省疾控中心，共40只，体质量为（20±2） g。饲养环境为12 h的明暗循环，温度为24~26 ℃，湿度为60% 相对湿度，通风良好，小鼠自由进食饲料和水。适应性饲养1周后，随机分为对照组的正常饮食组（normal diet，ND）、高脂饮食组（high fat diet，HFD）和应激组的正常饮食应激组（normal diet stress，NDS）、高脂饮食应激组（high fat diet stress，HFDS），每组各10只，饲养12周。ND、NDS喂食基础饲料，HFD、HFDS喂食高脂饲料（D12492，睿迪生物科技（深圳）有限公司）。NDS和HFDS给予慢性不可预测温和应激，共12周。
参照Carter
测试之前，小鼠自由饮食24 h，保持小鼠能自由饮用2瓶不同的水，其中一瓶为蒸馏水，另一瓶为1%的蔗糖水。为了防止小鼠对糖水位置有偏爱，在此期间，每隔12 h对调蒸馏水瓶和蔗糖水瓶的位置。此训练结束后，小鼠禁食禁水12 h，蔗糖水瓶和蒸馏水瓶称质量后放到鼠笼上，给予小鼠自由饮水6 h，然后称量2个水瓶质量。根据以下公式计算糖水偏好率：糖水偏好率=（糖水消耗量/总液体消耗量）×100%。
小鼠单独放入敞箱（50 cm×50 cm×40 cm）的中央格中，自由探索5 min。用视频跟踪系统记录小鼠的运动距离、进入中心区域次数、支撑性站立次数等指标。每次试验结束后，用75%的乙醇清洗试验区域。
该测试装置为1个（42 cm×21 cm×25 cm）盒子，盒内分为小（1/3）暗室和大（2/3）亮室，1个3 cm高、4 cm宽的受限开口连接2个腔室。小鼠单个放置在有照明的隔间里，并可在2个隔间之间自由移动。用视频跟踪系统记录5 min内小鼠在光室和暗室的停留时间及穿梭次数。试验结束时，及时清理小鼠的排泄物。
高架迷宫装置的主体部分由大小相同的2个张开的臂和2个闭合的臂（5 cm×15 cm×35 cm）组成。1个中央开放区域（5 cm × 5 cm）连接4个手臂，让小鼠自由地进入每个臂。小鼠被单独地放在中央区域，面对张开的臂，自由探索5 min，视频跟踪系统将小鼠在迷宫中的活动记录下来。为避免前一只小鼠的气味干扰，后一只小鼠测试前，用75%的乙醇清洗除掉小鼠的尿液和粪便。
小鼠处死前，对其禁食但不禁水12 h。采用摘除眼球取血的方式取血后，立即颈椎脱臼处死小鼠，打开头颅取脑，并在冰上剥离海马体。打开腹腔，取出肾周脂肪组织、附睾脂肪组织、腹股沟脂肪组织等，称脂肪组织的质量。全血室温静置30 min后，1 300 r/min 4 ℃离心15 min，用移液枪小心吸取上层血清于干净EP管中备用，用于后续脂质指标及神经递质含量的测定。血清和海马体样本及时放在-80 ℃冰箱中保存。
使用试剂盒（A111-1-1，A110-1-1，南京建成生物工程研究所）测定血清中总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）含量；按照相应ELISA试剂盒（DB1296-Mu，DB459-Mu，上海沪鼎生物科技有限公司）操作手册，测定血清和海马体中的5-羟色胺（serotonin，5-HT）和去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）含量。组织样本预处理方法如下：称取海马体组织，每10 mg组织加入100 μⅬ的RIPA（RIPA∶PMSF=100∶1），在冰上裂解30~40 min，然后于12 000 r/min 4 ℃离心10 min，小心吸取上清，进行测定。
如
图 1 糖水偏好试验
Fig.1 Sucrose preference test
A：液体总消耗量；B：糖水偏好率。柱上不同字母表示组间具有显著性差异，P<0.05，n=6。A：Total liquid consumption； B：Sucrose preference.Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05，n = 6.
如
图 2 旷场试验
Fig.2 Open field test
A：运动轨迹；B：运动总距离；C：进入中心区域次数；D：跨格次数。柱上不同字母表示组间具有显著性差异，P<0.05，n=6~8。A：Trajectory diagram； B：Total distance； C：Number of entries to the center； D：Number of crossed squares.Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05，n=6-8.
如
图 3 明暗箱试验
Fig.3 Light/dark test
A：待在暗箱时间；B：待在明箱时间。图中不同字母表示组间具有显著性差异（n=6~8），P<0.05。A：Time in dark box； B：Time in light box.Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05.
如
图 4 高架十字迷宫试验
Fig.4 Elevated plus maze test
A：进入开放臂次数的百分比；B：待在开放臂时间的百分比。图中不同字母表示组间具有显著性差异（n=6~8），P<0.05。A：Percentage of the entries to the open arms； B：Percentage of the time in the open arms.Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05.
小鼠的体质量变化如
图 5 小鼠体质量和血脂指标
Fig.5 Body weight and blood lipids
A：1~12周体质量；B：第12周的体质量；C：体脂比；D：血清总胆固醇；E：血清甘油三酯。图中不同字母表示组间具有显著性差异（n=6~8），P<0.05。A：Body weight； B：Weight at week 12； C：Adipose/Weight； D：TC； E：TG.Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05.
如
图 6 血清（A、B）和海马体（C、D）中的5-羟色胺及去甲肾上腺素含量
Fig.6 5-HT and NE levels in serum （A，B） and hippocampus （C，D）
图中不同字母表示组间具有显著性差异（n=6~8），P<0.05。Different letters in the same graph indicate significant differences，P<0.05.
本研究利用CUMS诱导焦虑抑郁模型，探究了不同饮食模式对小鼠行为、体质量、血脂、单胺类神经递质的影响，揭示了高脂饮食在CUMS诱导的焦虑抑郁样行为的形成过程中的作用。结合行为学试验结果表明，长期高脂饮食易诱导焦虑抑郁样行为的产生，且高脂饮食联合CUMS会加重抑郁样行为。与正常饮食组（ND）相比，高脂饮食组（HFD）小鼠的糖水偏好率、旷场中的运动总距离、进入旷场中心区域次数、跨越格子次数、待在明箱时间和进入开放臂次数显著降低，表明长期高脂饮食会诱导小鼠愉悦感、自发活动和探索能力降低。同样地，黄志
脂代谢异常与肥胖、神经精神障碍等代谢紊乱疾病的发展密切相
单胺类神经递质，例如5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素等，直接或间接参与调节人的情绪，其功能障碍与焦虑抑郁等精神障碍疾病有
综上所述，高脂饮食更易诱导焦虑抑郁样行为的形成，且高脂肪饮食会加重CUMS诱导的焦虑抑郁样行为。不同饮食模式在CUMS诱导的小鼠焦虑抑郁样行为形成中的作用可能与脂质代谢、单胺类神经递质代谢途径有关，但是其具体机制仍待进一步研究。
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