摘要:本文从湖南省长沙县养殖场牛胃秸秆发酵物中筛选获得一株高产α-淀粉酶的菌株,命名为SCUEC8。通过对SCUEC8菌株形态学观察和生理生化特性,结合16S rDNA 序列对比分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。以SCUEC8菌株的总DNA为模板扩增其α-淀粉酶基因ba8a,构建pET28a(+)-ba8a重组质粒,转化大肠杆菌BL21菌株进行异源表达和纯化。进一步研究Ba8a蛋白酶学特性,结果表明:ba8a基因大小为1434 bp,Ba8a蛋白分子量为52.9 k Da;在反应pH为5.0、反应温度为45℃时,Ba8a蛋白相对酶活较高;Mn2+对Ba8a蛋白酶活性具有较高促进作用,Cu2+对Ba8a蛋白酶活性具有较高抑制作用;在pH为6.0,温度为0℃时,Ba8a蛋白较稳定。