烟草环斑病毒外壳蛋白基因片段原核表达载体的构建及表达
CSTR:
作者:
中图分类号:
S432.41
基金项目:
上海市科委科技计划 , 教育部长江学者和创新团队发展计划 ,
Construction of Prokaryotic Vector and Expression of the CP Fragment of Tobacco ringspot virus
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摘要:
根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量表达.重组蛋白经过Ni -NTA纯化后,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,TRSV-CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子质量约为34ku,并具有免疫学活性.以纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,多抗血清效价达1:409600,可以与重组蛋白发生抗原抗体反应.
Abstract:
The CP fragment of the Tobacco ringspot virus(TRSV) was amplified by RT-PCR,and inserted into the expression vector pET28a.The recombinant plasmid pET-CP was transformed into Escherichia coli BL21(DE3),the target protein was expressed with induction of IP
引用本文
乔艳艳,杨翠云,于翠,曹洁,马青,张丽莉.烟草环斑病毒外壳蛋白基因片段原核表达载体的构建及表达[J].华中农业大学学报,2008,27(3):
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