一步PCR法对拟南芥ATPK64基因的快速定点突变

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一步PCR法对拟南芥ATPK64基因的快速定点突变
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中图分类号:Q754
基金项目:国家自然科学基金 , 辽东学院校科研和教改项目

Site-directed Mutagenesis of the Gene Encoding a Serine/theronine Protein Kinase ATPK64 from Arabidopsis thaliana by One-step PCR

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采用部分互补的71物扩增表达载体的全序列,通过DpnⅠ酶切PCR产物去除甲基化的模板DNA,利用大肠杆菌自身的酶系统环化质粒DNA,只需设计1对引物,进行1次PCR反应,就直接获得了突变的表达载体.利用该方法成功地对拟南芥的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶编码基因ATPK64进行了定点突变.这种改进的DNA定点突变方法,具有简便、快捷、经济、成功率高的特点,是值得推广的PCR定点突变方法.

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王宏梅,赵心清.一步PCR法对拟南芥ATPK64基因的快速定点突变[J].华中农业大学学报,2008,27(1):

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