将密螺旋体菌株(包括猪痢疾密螺旋体和无害螺旋体)接种于华农1或3号血液琼脂平板上,置CO_2:H_2=20:80的环境中和37℃下培养5天。选择生长最好的琼脂平板,每个加入3ml PBS(0.01mol,pH7.2),洗下培养物,集中后加入等容积的S. H. 保护剂并使成均一的悬液分装安瓿瓶。用Edwards EF03型冻干机进行冷冻真空干燥,在真空状态下密封安瓿瓶,冻干菌种保存于4℃冰箱或-10～-15℃冰盒中。保存期:用新鲜保护剂者为8-13个月;用干燥保护剂者为二年。