• 2016年第35卷第5期文章目次
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    • >作物遗传改良与栽培
    • 6个玉米ERF基因的克隆、序列及表达分析

      2016, 35(5):1-8.

      摘要 (1496) HTML (0) PDF 6.25 M (2684) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用同源克隆的方法分离了6个玉米ERF (ethylene responsive element binding factor) 基因,分别命名为ZmERF4、ZmERF26、ZmERF28、ZmERF64、ZmERF89和ZmERF202。基因结构分析显示,ZmERF与拟南芥的AtERF可能存在差异。系统发育分析显示,ZmERFs与OsERFs的亲缘关系更加亲近,而与AtERFs的关系则稍远。RT-PCR表达分析表明,在乙烯利(ET)处理之后,这6个ZmERFs的mRNAs水平在叶中都是先积累后下降的,但其中4个基因(ZmERF4、ZmERF28、ZmERF64和ZmERF89) 在玉米根中都是呈现负调控的。在脱落酸(ABA)和茉莉酸(JA)处理下,6个ZmERF的mRNAs水平在叶中都发生了或多或少的变化,但是大部分基因在根中的表达量没有明显变化,特别是在JA处理之后。这些结果暗示ZmERFs可能在玉米根和叶的激素信号通路中发挥不同的作用。

    • >园艺.林学
    • 5个枳BOR基因的克隆与缺硼胁迫下的表达分析

      2016, 35(5):9-17.

      摘要 (1165) HTML (0) PDF 3.39 M (2103) 评论 (0) 收藏

      摘要:以柑橘砧木枳Poncirus trifoliata(L.)Raf.为材料,克隆BOR基因家族5个成员(PtrBOR1、PtrBOR2、PtrBOR3、PtrBOR4、PtrBOR5),并用qRT-PCR技术检测了基因在缺硼胁迫下的表达。结果表明: 5个BOR基因的ORF长度分别为2 145、2 133、2 211、1 998和2 034 bp;氨基酸多序列比对发现PtrBOR1、PtrBOR2和PtrBOR3具有细胞极性定位和内吞降解的氨基酸保守位点;系统进化分析可将PtrBORs编码蛋白分为2个亚群,PtrBOR1、PtrBOR2和PtrBOR3编码蛋白属于一个亚群,PtrBOR4和PtrBOR5编码蛋白属于另一个亚群。qRT-PCR的结果表明,PtrBOR4在叶中表达量最高,其余PtrBORs在根中表达量最高;缺硼胁迫下PtrBORs表达量均发生变化,且各成员表达模式各不相同,PtrBOR1、PtrBOR2和PtrBOR3在根中表达量升高,PtrBOR1、PtrBOR2和PtrBOR4在茎中表达量升高,PtrBOR1在叶中表达量升高,PtrBOR1和PtrBOR2都在至少2个组织中表达量升高。

    • 火龙果组培苗DNA甲基化变化及应答赤霉素效应

      2016, 35(5):18-26.

      摘要 (1306) HTML (0) PDF 2.31 M (2270) 评论 (0) 收藏

      摘要:以火龙果优良品种‘紫红龙’组培苗为试材,利用MSAP分子标记,探讨了棱数变异现象与DNA甲基化可能存在的联系,分析了培养时间及继代次数对组培苗DNA甲基化的影响;通过在培养基中添加0(对照)、1.5、3.0、4.5及6.0 mg/L GA,处理5 d后,检测DNA甲基化变化,阐述赤霉素对DNA甲基化变化的影响。结果显示:棱数变异与DNA甲基化水平变化并不存在相关性,而与少数位点的甲基化状态有关;随培养时间的延长和继代次数的增加,组培苗DNA甲基化水平呈现出升高的趋势;随GA质量浓度的增加,外胞嘧啶半甲基化水平呈先升高后降低的趋势,与内源GA含量变化趋势一致,而内胞嘧啶全甲基化水平呈先降低后升高的趋势;外源GA影响了内源GA的积累,与对照相比,DNA甲基化变异率分别提高3.6%、4.5%、 3.1%和2.7%,表明火龙果组培苗DNA甲基化对低浓度GA敏感,而对高浓度GA敏感性降低。

    • >资源与环境
    • 湖南省某铅锌矿土壤重金属污染分析与风险评价

      2016, 35(5):27-32.

      摘要 (1225) HTML (0) PDF 1002.35 K (2511) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用现场采样与室内分析方法测定湖南省某铅锌矿周边农田土壤中Cd、As、Pb、Cr、Cu、Zn和Ni等7种重金属的含量,运用单因子指数法、地质累积指数法、污染负荷指数法以及潜在生态危害指数法等评价方法对研究区土壤重金属污染状况和潜在生态风险进行评价。研究结果表明,Cd、As、Pb、Cr、Cu、Zn和Ni等7种重金属都存在不同程度的富集或污染;根据25个采样点计算得出的矿区污染负荷指数为2.6,表明整个矿区土壤重金属污染程度较重。Cd、Pb、As、Zn等重金属潜在生态风险指数属于中等及以上的风险状态,这些重金属的污染及潜在生态风险应当引起充分关注。此外,相关性分析与主成分分析结果表明,采矿作业可能是导致研究区农田土壤Cd、Pb、As、Zn等重金属含量升高的主要原因。

    • 三峡库区消落带土壤淹水对氮素转化及酶活性的影响

      2016, 35(5):33-38.

      摘要 (1120) HTML (0) PDF 1.03 M (2388) 评论 (0) 收藏

      摘要:以三峡库区消落带典型的紫色土为试验材料,通过原位试验研究不同淹水深度(0、2、5和15 m)对土壤氮素形态转化和酶活性的影响。结果表明:淹水180 d后,随着淹水深度的增加,铵态氮和硝态氮含量均逐渐降低; 与未淹水(0 m)对比,水深2 m处的铵态氮含量增加显著,而水深15 m处的硝态氮含量显著(P<0.05)减少。铵态氮和硝态氮含量对不同淹水深度的响应有显著差异(P<0.05)。对土壤无机氮(铵态氮+硝态氮)而言,水深15 m处的无机氮含量比未淹水(0 m)减少3.96 mg/kg。脲酶和亚硝酸还原酶活性随淹水深度增加有所下降,而羟胺还原酶和硝酸还原酶活性呈先下降后上升的趋势,并均在水深2 m处达到最大值。除脲酶外,其他酶活性均高于未淹水(0 m)处理。

    • 硫藤黄链霉菌基因组表达文库的构建及筛选

      2016, 35(5):39-44.

      摘要 (1988) HTML (0) PDF 1.84 M (2722) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了探讨硫藤黄链霉菌中可能存在的次级代谢产物合成及调控机制,以链霉菌整合型质粒pJTU2554为载体,构建了硫藤黄链霉菌的基因组表达文库。以模式菌株变铅青链霉菌为异源表达宿主,通过生物活性筛选获得9株具有抑菌活性的异源表达突变菌株,同时通过PCR筛选获得多个含有聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因的克隆子。TLC及HPLC-MS分析发现6个携带有aureothin生物合成基因簇的cosmid,通过异源表达在变铅青链霉菌中成功合成聚酮类抗生素aureothin,证实文库异源表达及筛选的有效性。

    • 阿维链霉菌BAC文库的构建及分析

      2016, 35(5):45-50.

      摘要 (1788) HTML (0) PDF 1.80 M (3610) 评论 (0) 收藏

      摘要:为进一步阐明阿维菌素的生物合成路径和调控途径,提高阿维菌素的产量,采用BamHⅠ限制性内切酶酶解阿维链霉菌基因组DNA的方法,构建了阿维链霉菌的细菌人工染色体(BAC)文库。该文库共包含2 304个克隆,平均插入片段为101 kb,空载率约9%,覆盖了该菌基因组的25.9倍。该文库的成功构建可以为其他微生物尤其是基因组具有磷硫酰化修饰的微生物的文库构建提供参考。

    • 华癸中慢生根瘤菌7653R SraG sRNA的共生固氮功能

      2016, 35(5):51-57.

      摘要 (1161) HTML (0) PDF 2.75 M (2131) 评论 (0) 收藏

      摘要:基于前期对华癸中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii) 7653R sRNA(small non-coding RNA,sRNA)的生物信息学预测,经Northern blot验证获得SraG sRNA。本研究采用RACE与转录组高通量深度测序确定了SraG全长,并分别利用RNAfold软件和TargetRNA软件预测了SraG二级结构和靶位点,进而构建了M. huakuii7653R的SraG插入失活突变体(M. huakuii SraGmut),并对突变体接种紫云英的共生表型进行了检测。盆栽试验结果表明,与野生型菌株M. huakuii 7653R相比,接种突变株M. huakuii SraGmut的固氮能力显著下降,突变株固氮酶活性下降约40%,植株鲜质量和根瘤数目也显著降低。结果表明,SraG的功能与M. huakuii 7653R的共生固氮过程相关,作为sRNA可能参与根瘤菌的共生固氮调控过程。

    • 球毛壳菌及其产生的鞘氨醇对油菜根肿病的室内生防作用

      2016, 35(5):58-62.

      摘要 (1102) HTML (0) PDF 1.06 M (2489) 评论 (0) 收藏

      摘要:采用灌根接种法研究内生真菌球毛壳菌(Chaetomium globosum)对油菜根肿病的室内生防作用。结果表明,灌根接种球毛壳菌孢子悬浮液后,油菜体内的过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶的活性均明显提高。球毛壳菌孢子悬浮液灌根接种油菜根部后,根肿病的发病率和病情指数均明显降低,对油菜根肿病的防效为76.88%。通过极性梯度萃取、薄层层析和HPLC从球毛壳菌发酵液中分离纯化活性物质,经质谱鉴定为C16鞘氨醇和植物鞘氨醇。鞘氨醇对根肿菌休眠孢子的萌发有明显的抑制作用,其MIC值小于0.1 μg/mL,表明球毛壳菌防治油菜根肿病的机制为诱导系统抗性和次生代谢产物拮抗病原菌2种机制。

    • >动物科学.动物医学
    • 杜泊羊体外胚胎生产效率的影响因素

      2016, 35(5):63-67.

      摘要 (1128) HTML (0) PDF 921.39 K (2195) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了将绵羊体外胚胎发育技术应用于生产,采用活体采卵-体外受精的方法,对准备淘汰的杜泊羊进行外源激素处理,并对可能影响体外胚胎发育及移植后受胎效率如FSH剂量、公羊个体、获取卵母细胞方式等因素进行研究,结果发现:(1)每只供体注射FSH 240 IU或420 IU剂量对获得卵母细胞数、胚胎数及体外受精卵裂率没有明显影响(P>0.05);(2)不同公羊个体对卵母细胞体外受精效率有显著影响,但胚胎移植后受胎率没有明显影响(P>0.05);(3)活体采卵与屠宰场采卵方式相比,对卵母细胞的回收没有影响(12.24 vs 13.84,P>0.05),但活体采集卵母细胞受精后的平均胚胎数显著低于后者(7.50 vs 11.17,P<0.05),卵裂率极显著低于屠宰场采卵方式(60.92% vs 81.75%,P<0.01);(4)上述几组试验对受胎率都没有影响(P>0.05)。由此可见,供体使用240 IU的FSH,选择受精效率好的公羊,能显著提高杜泊羊体外胚胎生产效率;离体采集卵母细胞体外发育效率高于活体采卵。

    • 畜禽群体中基于SNP标记的亲子鉴定及亲本推断方法

      2016, 35(5):68-74.

      摘要 (1444) HTML (0) PDF 1.10 M (3315) 评论 (0) 收藏

      摘要:利用双亲高密度SNP标记信息,在畜禽群体中进行亲子鉴定及亲本推断新方法的计算机程序开发,并使用模拟的600 000个SNP标记对该程序进行测试。结果表明:对系谱正确性进行鉴定时,SNP标记数大于100即可达到100%的亲子鉴定准确率;对错误的系谱关系进行潜在亲子关系推断时,SNP标记数大于300可保证100%的推断准确率。标记平均MAF较低会降低亲子推断准确率。在程序运行效率方面,当使用50 000的SNP标记对1 000条错误率为10%的系谱进行亲子鉴定和推断时,共耗时332.87 s,且计算耗时与标记数及个体数呈线性变化。本研究基于孟德尔遗传原理,设计并开发了基于双亲及后代基因型的亲子鉴定及亲本推断程序,该方法运行速度快,操作简单,准确性高,值得在畜禽群体基因组相关研究方面进行推广应用。

    • 射流式鱼泵胁迫下草鱼的应激响应

      2016, 35(5):75-83.

      摘要 (1041) HTML (0) PDF 1.37 M (2039) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究草鱼鱼种通过不同参数条件下(分为工况一、工况二、工况三、工况四)的射流式鱼泵后分别恢复0、0.5、1、6、24 h,和过泵前相比其血清皮质醇(COR)、血糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(CREA)以及呼吸频率(Respiratory rate)的变化情况,从应激和组织损伤的角度分析了该泵4个工况对试验草鱼的影响。结果发现,各工况试验草鱼血清COR、LDH、AST、ALT、CREA以及呼吸频率均呈现先升高后降低的变化规律,各工况试验草鱼血糖呈现先降低后升高的趋势,而各工况试验草鱼血清TC基本无变化。此外,各工况均出现掉鳞的情况,但未发现试验草鱼游泳异常,解剖后也未发现鱼鳔破裂以及内脏受损的情况。通过对比各工况试验结果,发现工况三对试验草鱼影响最小。

    • 泥鳅属和副泥鳅属鱼类自交及杂交子一代生长性能及丙二醛含量的比较

      2016, 35(5):84-89.

      摘要 (1270) HTML (0) PDF 1014.99 K (2298) 评论 (0) 收藏

      摘要:以泥鳅属鱼类黑龙江泥鳅(Misgurnus mohoity,H)、北方泥鳅(Misgurnus bipartitus,N)、泥鳅(Misgurnus anguillicaudarus,二倍体B,四倍体T)和副泥鳅属鱼类大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus,P)为亲本,进行自交与正反交,获得11种子代,它们分别为(雌×雄):H×H(HH)、N×N(NN)、P×P(PP)、B×B(BB)、P×B(PB)、N×H(NH)、N×P(NP)、P×H(PH)、B×P(BP)、T×P(TP)、P×T(PT)。经过270 d的养殖试验,在60、90、120、150和270 d这5个时间点测定了这11种子代的全长和体质量,同时在60、90和120 d对丙二醛(MDA)含量进行了评估。结果表明:(1)NP在饲养试验中一直保持较好的生长性状;(2)PB与PP在60~90 d的早期阶段,生长趋势较差,之后随着时间的推移开始上升,表现出较好的生长趋势,且这2种子代之间无显著性差异。PB在270 d时体质量显著性高于其他子代;(3)NP在60 d和90 d所占全长和体质量最大20%的比例均高于其他子代。TP在270 d时在全长和体质量最大和最小20%中出现频率都较高,而PB在所有采样时间点全长和体质量的最大和最小20%中的出现频率都较高;(4)具备优良生长性状的NP、PP及PB中,NP和PP在养殖过程中均具有较低的MDA含量,PB的MDA含量在第90天升高,然后长期处于较高水平。由此推断,NP和PP在生长和免疫机能上都具有优势;PB在生长性状上具有选育潜力。

    • 金鼓鱼幼鱼对脂肪的适宜需要量

      2016, 35(5):90-96.

      摘要 (1438) HTML (0) PDF 1.01 M (2185) 评论 (0) 收藏

      摘要:为确定金鼓鱼(Scatophagus argus)日粮中脂肪的适宜添加量,以鱼油为脂肪源,配制脂肪水平分别为3%、6%、9%、12%、15%的5种等氮的配合饲料(F1~F5),在海上网箱中对初始体质量为4.3 g左右的幼鱼进行为期8周的养殖试验,测定其生长、免疫与抗氧化指标、内源性消化酶活性等。结果显示,增重率、特定生长率以饲料脂肪水平为9%的F3组最大,与饲料脂肪水平为12%和15%的两试验组间没有显著差异;蛋白质效率以饲料脂肪水平为12%的F4组最大,在F2~F5组间没有显著差异;饵料系数以饲料脂肪水平为9%的F3组最低,在F2~F5组间没有显著差异,其变化趋势与上述3个指标相反;肝体比随饲料脂肪水平的升高而不断上升,饲料脂肪水平为15%的F5组鱼的肝体比显著大于F1和F2组。饲料脂肪水平也显著影响金鼓鱼的粗脂肪、粗蛋白、灰分及水分含量。当饲料脂肪水平为9%时,金鼓鱼胃和肠道的脂肪酶活性较高,且肠道和肝脏的免疫与抗氧化指标较好。根据饲料脂肪含量与金鼓鱼的增重率、饵料系数分别作曲线回归分析,确定金鼓鱼饲料脂肪的适宜添加量为8.6%~11.0%。

    • 迟钝爱德华氏菌外膜蛋白基因工程表达产物的免疫原性

      2016, 35(5):97-104.

      摘要 (1014) HTML (0) PDF 2.35 M (2373) 评论 (0) 收藏

      摘要:构建迟钝爱德华氏菌外膜蛋白重组表达载体后,表达纯化获得分子质量约53 ku的外膜蛋白。将100尾日本鳗鲡均分为2组,分别腹腔注射牛血清白蛋白(BSA,0.5 mg/mL)和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白(Omp,0.5 mg/mL)0.2 mL/尾。于免疫后第7、14和28天采集鳗鲡血液、粘液、肝脏和肾脏,测定各时间点的补体活性、溶菌酶活性、全血细胞转化水平和血清抗体效价。结果发现,外膜蛋白组鳗鲡的补体活性于免疫后第7天极显著高于对照组;其抗体效价于第14天和第28天显著或极显著高于对照组。免疫后第28天以迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌和创伤弧菌(1.0×107 cfu)腹腔注射感染鳗鲡。结果发现,外膜蛋白组鳗鲡对迟钝爱德华氏菌、嗜水气单胞菌和创伤弧菌的相对免疫保护率分别为71.4%、50.0%和12.5%。表明鳗鲡注射迟钝爱德华氏菌基因工程表达外膜后显著提高了其对迟钝爱德华氏菌感染的抵抗力,对嗜水气单胞菌的感染也有明显的交叉保护效果,但对创伤弧菌的交叉保护效果较弱。

    • >食品与农业工程
    • 不同预处理方法对酶法制备的草鱼鳞胶原蛋白肽特性的影响

      2016, 35(5):105-111.

      摘要 (1294) HTML (0) PDF 1.66 M (2444) 评论 (0) 收藏

      摘要:以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鳞为原料,采用3种常用工业蛋白酶酶解3种经不同预处理方法处理过的鱼鳞,经酶解、离心分离、冷冻干燥等工序制备胶原蛋白肽,比较不同预处理方法制得胶原蛋白肽的产率及产物特性。结果表明,预处理方法对鱼鳞酶解产物的氮收率、水解度和氨基氮生成量有显著影响(P<0.05),适宜的预处理方法为热处理结合粉碎处理;预处理方法对产物的分子质量及其分布影响不明显,产物的高效液相图谱均有3大组分峰,分别在10 000~14 000、8 000~9 000、4 000 ku附近;预处理方法对胶原蛋白肽的DPPH·清除率影响显著,主要受热处理影响,粉碎处理的影响较小。综合胶原蛋白肽的产率及产物特性,理想的鱼鳞预处理方法为热处理结合粉碎处理。

    • 预处理方式对微粒化白鲢鱼骨泥物理特性的影响

      2016, 35(5):112-116.

      摘要 (1105) HTML (0) PDF 2.94 M (1969) 评论 (0) 收藏

      摘要:以白鲢(Hypophthalmichthys molitrix)鱼骨为原料,采用湿法粉碎的方法制备微粒化鱼骨泥,研究不同的预处理方式(常温加冰、低温冷冻、100℃蒸煮和120℃蒸煮)对鱼骨泥物理特性的影响。结果表明,采用120℃蒸煮预处理后加工制备的鱼骨泥中鱼骨颗粒的粒度最小(164.11 μm),其次分别为低温冷冻组(317.40 μm)、100℃蒸煮组(343.47 μm)和常温加冰组(522.61 μm)。120℃蒸煮预处理后加工制备的鱼骨泥中鱼骨颗粒的比表面积显著(P<0.05)大于其他3组的比表面积。低温冷冻预处理后加工的鱼骨泥中鱼骨颗粒多呈短棒状,表面光滑;而蒸煮预处理的鱼骨颗粒接近球形,表面凹凸不平。与常温加冰和低温冷冻加工预处理组相比,采用高温蒸煮预处理后加工的鱼骨泥的b*值、L*值、持水性、乳化活性指数和乳化稳定性相对较高(P<0.05),而粘度值相对较低(P<0.05)。

    • 油菜联合收获机梳脱式割台设计

      2016, 35(5):117-124.

      摘要 (1756) HTML (0) PDF 1.41 M (2441) 评论 (0) 收藏

      摘要:针对油菜植株生物学特性和成熟期果荚易炸裂的特点,设计一种油菜联合收获机的梳脱式割台。通过建立梳脱滚筒、拨禾轮等部件的运动学模型,确定拨禾轮、梳脱滚筒、切割装置和防飞溅罩壳的结构参数和运动参数,确定合理的参数组合,并开展梳脱滚筒运动仿真分析。结果表明,梳脱弹指间距为70 mm,弹指轴向倾角小于82°时,可以实现梳脱元件地面投影对作物完全覆盖;当机组前进速度为0.4~1.8 m/s时,为达到较好的梳脱效果,对应的拨禾轮转速和梳脱滚筒转速分别为20~30、220~270 r/min,且二者的水平距离应大于374 mm。仿真和田间试验表明,梳脱式割台可以实现油菜收获的拨禾、梳脱、抛送、切割等功能。

    • 莲藕力学特性的试验研究

      2016, 35(5):125-130.

      摘要 (1094) HTML (0) PDF 1.83 M (2289) 评论 (0) 收藏

      摘要:以藕身含水率82.78%~86.69%的“鄂莲5号”为研究对象,采用TMS-Pro质构仪和RGM-3005微机控制全数字化电子式万能材料试验机对其藕身果肉部分、藕段截面及单节藕段进行压缩试验,对藕节进行弯曲和拉伸试验。结果表明:藕身果肉部分的抗压强度为0.908~1.750 MPa,弹性模量为0.451~2.529 MPa,同一藕段藕身果肉靠近表层部分相同方向的抗压强度和弹性模量均大于心部,同一藕段藕身果肉的轴向弹性模量大于径向,藕身〖JP1〗果肉部分存在各向异性特性;藕节平均抗弯强度从藕节Ⅰ至藕节Ⅲ分别为1.337、1.227、1.153 MPa;藕节平均拉伸强度从藕节Ⅰ至藕节Ⅲ分别为0.546、0.560、0.551 MPa,藕节抗弯强度和拉伸强度均与直径正相关。

    • 典型品种花生种子尺寸及均齐性研究

      2016, 35(5):131-136.

      摘要 (1335) HTML (0) PDF 1.07 M (2465) 评论 (0) 收藏

      摘要:选择辽宁省主栽的6种典型花生为研究对象,对种子尺寸和均齐性进行分析。使用统计学方法,以种子的三轴尺寸、平均径、百粒重为指标,分析种子三轴尺寸的统计分布特性、均齐性以及种子尺寸与百粒重的关系。结果表明,不同品种花生种子的三轴尺寸总体上存在显著性差异,但均服从正态分布;花生种子的三轴尺寸间存在线性相关;不同品种花生种子的均齐性存在差异;花生种子的几何平均径、算数平均径与百粒重的变化趋势相似。研究结果表明,不同品种花生种子的尺寸及均齐性存在差异。因此,应综合考虑多种因素对种子进行清选分级。

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