Page 24 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2023年第2期
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18 华 中 农 业 大 学 学 报 第 42 卷
［8］
BCV 是导致巴西 BRDC 的常见病原 。牛支原体和 3.2 病原分离鉴定
多杀性巴氏杆菌 A 型是我国 BRDC 的常见病原 ［9］ 。 病原分离鉴定是 BRDC 诊断的金标准，但这些
然而，这种优势病原体及其组合处于不断的变化之 病原体常在牛体内呈隐性感染，如牛支原体 ［12］ 、多
中。在澳大利亚，牛支原体在牛群 BRDC 中的致病 杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌和昏睡嗜组织杆
地 位 长 期 处 于 被 忽 视 状 态 ，直 到 近 几 年 才 得 到 菌 ［14-17］ 等细菌性病原，以及 BVDV、BoHV-1、BPIV-
关注 ［10］ 。 3 和 BRSV 等病毒性病原。当机体受到各类应激因
素（如长途运输、分娩、初生、断奶、转群等）的刺激
2 BRDC的流行和危害
时，相关病原体移至下呼吸道大量增殖并致病 ［18］ 。
BRDC 是影响牛的最常见且经济损失最大的疾 由于临床上缺少多联、快速、简易、低廉的病原学检
病，也是研究最广泛的家畜疾病之一。美国等发达 测方法，往往难以确诊多病原混合感染，延误治疗的
国家自从 BRDC 在 20 世纪 80 年代被首次提起，就开 最佳时机，导致疗程长和疗效差、后遗症（肺炎病灶、
始对 BRDC 进行攻关研究。BRDC 除了导致死亡和 关节炎等）多。
淘汰以及诊疗带来的直接损失外，还有因为饲料报 3.3 分子生物学诊断
酬下降、胴体肉质等级下降等带来的间接损失。在 分子生物学诊断技术有核酸探针杂交、核酸测
美国一些养殖场中，BRDC 占整体发病率的 65%~ 序和聚合酶链式反应（PCR）等。核酸探针杂交是指
［8］
85%、整体死亡率的 45%~75% 。据估算，BRDC 使用标记的核酸片段同病原的靶片段进行特异性互
［2］
每年给美国肉牛养殖业造成的损失超过 5 亿美元 ， 补配对而进行检测的一种技术。核酸测序是指使用
每年给欧洲造成的损失约为 5.76 亿欧元 ［10］ 。在我 测序仪对全基因组或者某个基因进行核苷酸序列的
国，自 2008年首次报道牛支原体肺炎后，育肥牛场新 测 定 并 进 行 数 据 库 比 对 从 而 得 出 结 果 的 一 种 方
引入架子牛的 BRDC 发病率在 60% 以上，病死率平 法 ［19］ 。PCR 是检测 BRDC 的常用方法，根据 PCR 扩
均 10%，有些甚至高达 40% 以上。BRDC 也是新生 增产物的有或无来表示患病动物是否被特定病原体
犊牛的常发病。BRDC 还因为临床治疗效果差、治 感染，其改进趋势是向多重检测及可视化方向发
疗周期长（多在 1 个月以上）、康复牛生长缓慢、发生 展 ［20］ 。Loy 等 ［21］ 开发了一种使用 Taqman 探针的多
关节炎等后遗症严重影响养牛业的生产效益和动物 重实时 PCR，以同时检测牛支原体、多杀性巴氏杆
福利 ［11-12］ 。 菌、溶血性曼氏杆菌和昏睡嗜组织杆菌。Peltzer
等 ［22］ 开发了一种基于 LAMP 的可视化方法快速检
3 BRDC的诊断方法
测 BoHV-1 的方法。笔者所在课题组也已开发出针
3.1 临床诊断 对 BRDC 病 原 的 多 重 PCR 以 及 LAMP 的 检 测 方
BRDC 的及时诊断是遏止 BRDC 蔓延及减少经 法 ［23-24］ 。但这些方法大多处于实验室研究阶段，离
济 损 失 的 关 键 。 BRDC 多 发 生 在 新 引 进 牛 和 犊 试剂盒商业化应用还有一定距离。
牛 ［13］ ，目前常用的诊断方法是在运输背景下提出以 3.4 血清学方法
观察临床症状和行为变化为主要内容的 DART 法， 血清学检测的基础是抗原与抗体特异性结合，
即抑郁、厌食、呼吸异常和直肠温度升高 ［14］ 。抑郁包 根据检测对象可分为检测抗体与检测抗原，常见的
括情绪低落、头垂、眼睛呆滞或凹陷、动作迟缓等，厌 血清学检测方法有病毒中和试验（VNT）、酶联免疫
食包括断食、少食和明显的体质量损失等，呼吸异常 吸附试验（ELISA）、间接血凝试验（IHA）等 ［25］ 。简
包括明显的呼吸困难、头部和颈部伸展以及呼吸音 单定性中和试验可以用于检出病料中的病毒或血清
等，直肠温度升高是指直肠温度高于40 ℃。 中的抗体。诊断 BoHV-1 感染的金标准是 VNT，但
由于 DART 法是一种临床定性评价方法，不能 其操作繁琐且需要细胞培养设施，该方法在 IBR 检
充分评估 BRDC 的严重程度，所以有时用全群治疗 疫中逐渐被 ELISA 取代 ［26］ 。Khan等 ［27］ 建立了以 M.
的方式以最大限度地阻止疾病的蔓延和降低疾病导 bovis 的特异性膜脂蛋白 MbovP579 作为包被抗原的
致的损失。这种无差别的治疗方式由于对一些不需 间接 ELISA 用以检测血清抗体，该方法对临床样品
要干预的动物也采取了相同的措施，从而增加了治 的敏感性为 90.2%，特异性为 97.8%。李艳婷等 ［28］
疗成本。 以重组纯化的 BRSV-G 蛋白制备的抗 G 蛋白的单克
