Page 44 - 《华农农业大学学报》2020年第3期
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第 ３ 期                 王轩轩 等:湖北伦晚脐橙越冬黑点病发生动态及病原菌生物学特性                                     ３ ９

               红壤土; １５０~１６０ 棵; 品种为伦晚脐橙( 原为罗脐, 培养. ３０d时统计载孢体数量, ５５d 时统计分生孢
               高接换种 时 间 ４a ), 树 龄 ２４a ; 黑 点 病 病 果 率 约          子量.每个处理 ３ 个重复.
               ８０％ .果园二: 面积 １４６７ m ; 坡地( 坡 度约 ４５° ), 1.4  温度对 ZGDC50 菌株分生孢子萌发的影响
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               地面杂草覆盖率约 ４０％ ; 红壤土; １８０ 棵; 品种为伦                      收集 PDA 培养基上形成的菌株 ZGDC５０ 分生
               晚脐橙( 原为罗脐, 高接换种 ８a ); 树龄 ２６a ; 黑点               孢子, 配制成 １０ 个 / mL 孢子悬浮液.取 ５００ μ L 孢
                                                                             ６
               病病果率约 ３５％ .                                     子悬浮液涂布于 PDA 平板上, 吹干后放置在 ２８℃
                   ２ 个果园农事操作相同: ４ 、 ５ 、 ６ 、 ７ 和 ９ 月份每月         培养箱黑暗条件下培养, 分别于 ４ 、 ６ 、 ８ 和 １２h 观察
               用药 １ 次, 其中杀菌剂为 ８０％ 代森锰锌可湿性粉剂                    孢子萌发情况, 确定孢子萌发的时间.
               ６００~８００ 倍液; 春、 夏、 秋各施用 １ 次复合肥, 冬季                    取 ５００ μ L 孢子悬浮液涂布于 PDA 平板上, 吹
               施用有 机 肥; １１ 月 用 波 美 度 为 ０．１８ 的 石 硫 合 剂          干后放置在 １５ 、 ２０ 、 ２５ 、 ３０ 和 ３５℃ 的培养箱中观察
               清园.                                             孢子萌发情况.每个处理 ３ 个重复.
               1.2  黑点病发生动态调查                                  1.5  温度对染病枝条分生孢子形成的影响
                   １ ) 调查方法.在每个果园内, 按果园对角线选                         在果园采集直径 ３~５mm 发病程度一致的黑
               树取样, 采用大 ５ 点取样选 ５ 株果树, 每株果树分东                   点病枝条 １０ 支, 剪成 １００mm 长小段, 用吸水纸保
               南西北 ４ 个方位, 分别选取 １０ 个果实; 为了避免病                   湿.分别放置在 ２５℃ 和 １５℃ 的条件下, 观察黑点
               原菌在田间分布不均匀导致的误差, 尽量选取发病                         病枝条变成枯枝及分生孢子产生情况, 每处理 ３ 个

               的果树和果实.在果面( 果实阴面阳面为随机选择) 重复.
               定点选取 ４０mm ×４０mm , 对选定区域的病斑数量                    1.6  温度对 ZGDC50 菌株侵染柑橘果实的影响
               进行 跟 踪 调 查. 调 查 日 期 分 别 为 ２０１７ 年 １２ 月                将分生孢子配置成 １０ 个 / mL 孢子悬浮液, 选
                                                                                       ６
               １ 日、 １２ 月 １１ 日、 １２ 月 ２２ 日及 ２０１８ 年 １ 月 １１ 日、 择健康、 成熟的椪柑和伦晚脐橙 ２ 个品种的柑橘果
               ２ 月 ２ 日、 ２ 月 ２５ 日、 ３ 月 １３ 日、 ３ 月 ２８ 日和 ４ 月      实进行有伤和无伤接种.将果实用 ７５％ 乙醇表面

               １２ 日, 共调查 ９ 次.                                  消毒 ５min , 然后用无菌水洗 ２ 次.在果蒂周围用
                   ２ ) 病 害 分 级. 病 害 调 查 的 分 级 标 准     [ ８ ] 如 下: 接种针刺伤, 伤口直径长约 ５mm , 深约 ５ mm .在
               ０ 级: 无病斑; １ 级: 病斑细小、 斑点不易辨析, 影响果                接种柑橘下放置吸水纸保湿, 隔天观察.将接种的
               实商品性不重, 病斑范围占整个果实面积 ５％ 以下; 果实分别置于 １５ 、 ２０ 、 ２５ 和 ３０℃ ４ 个温度条件, 观
               ３ 级: 病斑斑点容易辨析, 已经影响果实商品性, 病                     察果实发病情况, 确定温度对菌株 ZGDC５０ 侵染的
               斑范围占整个果实面积 ５％~１０％ ; ５ 级: 病斑范围                   影响.
               占整个果实面积 １１％~２５％ , 病斑斑点较大, 已经                    1.7  数据分析
               明显影响果实商品性; ７ 级: 病斑范围占整个果实面                           试验 数 据 用 MicrosoftExcel 处 理, 再 用 软 件
               积的 ２６％~５０％ , 病斑斑点大, 已经严重影响果实                    DPS 进行数据分析.
               商品性; ９ 级: 病斑范围占整个果实面积 ５０％ 以上,
                                                               2 结果与分析
               病斑斑点大而明显, 果实商品性完全下降.
                      病情指数 ＝ ( Σ ( 各级发病数 × 该病级数)/              2.1  果实黑点病发生动态
                                                                    本试验在 ２０１７ 年 １２ 月 －２０１８ 年 ４ 月期间一
                           调查总数 × 最高级数) ×１００
                   气象数据由 htt p    :// tian q i．eastda y ．com 提供.  共调查 ９ 次, ２ 个果园分别获得 １９２ 和 １８９ 个果实
               1.3  温度对 ZGDC50 菌株菌丝生长及分生孢子形
                                                               的有效数据.以 ４０mm×４０mm 面积为单位, 每单
               成的影响
                                                               位病斑数按如下进行分段统计: ０~５ 、 ６~２５ 、 ２６~
                  将培养 ７d 的病原菌用直径 ５ mm 打孔器打                     ５０ 、 ５１~１００ 、 １００ 以 上. 图 １ 展 示 了 第 １ 次
               孔, 将菌丝块接种在马铃薯葡萄糖培养基上, 分别放                       ( 图 １A )、 第 ５ 次 ( 图 １B ) 和第 ９ 次 ( 图 １C ) 病 斑 数
               置在 １５ 、 ２０ 、 ２５ 、 ３０ 和 ３５℃ 条件下黑暗培养.第 ３ 据.经分析可知: 与第 １ 次( １２ 月 １ 日) 调查结果相
               天起开始测量菌落直径.将菌株接种在燕麦培养基                          比, 第 ９ 次( ４ 月 １２ 日) ２ 个果园的发病率和病情指
               上  [ ９ ] , 分别放置在 １５ 、 ２０ 、 ２５ 、 ３０ 和 ３５℃ 条件下黑暗  数均无变化.
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