Page 46 - 《华农农业大学学报》2020年第4期
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                                                   华 中 农 业 大 学 学 报                                    第 ３９ 卷
                ４
               接 种 USDA１１０ 菌 剂, 拌 种; 处 理 ３ ( R２ ): 接 种         关参数.田间试验采用拌种的方法: 将粘合剂阿拉
               HH１０３ 菌剂, 拌种; 处理 ４ ( P ): 接种 HZP１ 菌剂, 拌         伯树胶粉７g 溶于４０~５０mL 水中, 用液体粘合剂将

               种; 处理５ ( P＋R ), 按照 m USDA１１０∶m HH１０３∶m HZP１＝    固体菌剂调成糊状, 按每１００g 菌剂拌种１k g 大豆种
               １∶１∶２ 的 比 例 进 行 菌 剂 拌 种.每 个 处 理 ３ 个 重           子, 混匀后, 铺于报纸上晾干.当天完成播种.
               复, 随机排列.大豆成熟后, 收获并测定每个小区大                       1.5  数据分析与处理
               豆产量.                                                 利用 MicrosoftOfficeExcel２００７ 进行数据统
                   河北小区试验地设在石家庄农科院堤上试验基                        计, 显著性分析采用 SPSSＧANOVA 进行.
               地, 土壤为上层褐土, 前茬小麦, 肥力中等, 土壤理化
                                                               2 结果与分析
                                                         / ,
                                     / ,
               性质: 速效钾 ２８１．６６m gk g 速效磷 ２１．０３ m gk g
               有机质含量 ２１．７２gk g 全氮 ０．１５gk g p H７．５６ . 2.1  解磷菌的分离和鉴定
                                                / ,
                                 / ,
               播种冀豆 １２ 和冀豆 １７ .每个小区有 ４ 行, 行间距                       利用解无机磷选择性培养基从大豆中黄 １３ 根
               ０．５m , 每行 ６m .每个小区播种 ４８０~５００ 粒大豆                瘤材料分离得到 １ 株解磷菌 PSBＧ１ ; 从大豆根际土
               种子.待出苗后, 按每１０cm 保留１ 株的标准间苗. 壤中 分 离 得 到 １ 株 解 磷 菌 HZP１ . 将 扩 增 的 １６S
               菌种 为 大 豆 根 瘤 菌 S． f redii HH２９ 及 解 磷 菌 rDNA 序列经过测序和 NCBIBlast序列比对分析,
               PSBＧ１ . 试验设 ４ 个处理, 每个处理 ３ 个重复.试验                得知 HZP１ 为巨大芽胞杆菌属( Bacillusme g ateriＧ
               设计与产量测定同湖北小区试验基本一致, 但菌种 um ) 细菌, PSBＧ１ 为肠杆菌属( Enterobacter ) 细菌.
               选择不同.                                           2.2  PSB Ｇ 1 和 HZP1 解磷能力的测定
                   草炭先用孔径 ０．３ mm 筛初筛, 再用 孔 径 ０．２                    通过钼锑钪比色法测定培养 ６０h 发酵液中可
               mm 筛复筛, 之后将 ４５０g 草炭 ＋ ５０g 磷矿粉装袋                 溶性磷含量( 表 １ ), 结果显示: 接种 PSBＧ１ 和 HZP１
               并混匀, １２１℃ 灭菌 ６０ min .将活化好的大豆根瘤                  与接入等量灭菌水( CK ) 相比, 发酵液中可溶性磷含
               菌菌株和解磷菌 HZP１ 接种于 ２５０ / ５００mL 三角瓶                量分 别 增 加 了 ７．３１ 和 ４．８４ 倍, 达 到 ３０７．４４ 和
               的 BSE 培养液中, 解磷菌 PSBＧ１ 接入 LB 液体培养 １９３．７２m g L .以加入等量的 LＧ 色氨酸 LB 液体为
                                                                        /
               基中.根瘤菌采用２８℃ 摇床培养２~４d , 解磷菌培                     对照, 测得 ２ 种细菌均有产生IAA 的能力. １２h 发

               养１~２d至其 OD ６００ 约为 １．８ , 将培养好的菌液 １５０ 酵液 中 HZP１ 和 PSBＧ１ 产 IAA 分 别 达 到 ７３．５６ 、
                                                                       /
               mL 混入 ５００g 草炭中制成草炭菌剂.测定菌剂相 ３２．７６m g L .
                                           表 １ ２ 种 PGPR 菌株的溶磷量及IAA 含量( n＝３ )
                                      Table１ The p hos p hatesolubilizin g ca p acit y oftwoPGPRstrains ( n＝３ )
                                                                  与对照相比增加倍数
                                           可溶性磷含量 /( m g / L )                                IAA 含量 /( m g / L )
                 菌株 Strain     A ７００                             Increaseinmulti p les  A ５３０nm
                                           ContentofsolubleP                                    ContentofIAA
                                                                 com p aredwithcontrol
                    CK      ０．１８６±０．００９       ４２．６１±１．７７６               ０               ０            ０
                   PSBＧ１    １．４９４±０．０４９      ３０７．４４±９．５５７           ７．３１±０．０８５      ０．６１２±０．０１９  ３２．７６±０．８５
                   HZP１     ０．９８２±０．０４０      １９３．７２±７．８８４           ４．８４±０．３０１      １．５３４±０．０１１  ７３．５６±０．５１

               2.3  PSB Ｇ 1、 HZP1 与根瘤菌双接种对大豆结瘤及                加 １４．３７％ 、 ２６．９４％ 和 ３１．２３％ ( 表 ２ ). 双 接 种
               生长的影响                                           HH２９＋PSBＧ１ 对根瘤固氮酶活无显著影响.结果
                  为了模拟田间试验环境, 采用了未灭菌土壤种                        表明: 将解磷菌 PSBＧ１ 与根瘤菌双接种可以促进大
               植大豆, 并检测解磷菌 PSBＧ１ 和 HZP１ 及其与根瘤                  豆结瘤, 提高结瘤数和根瘤鲜质量, 进而促进大豆生
               菌混合接种对大豆结瘤固氮的影响, 将冀豆 １７ 幼苗                      长, 提高大豆生物量.
               分别单接种解磷菌 PSBＧ１ 、 根瘤菌 HH２９ 及双接种                       将大豆中黄 １３ 分别单接种解磷菌 HZP１ 、 根瘤
               HH２９＋PSBＧ１ .接菌 ２８d 后, 统计植株共生表型. 菌 USDA１１０ 及双接种 USDA１１０＋HZP１ , 统计植
               结果显示, 双接种 HH２９＋PSBＧ１ 时, 植株根瘤数和                  株共生表型, 结果( 表 ３ ) 显示: 双接种 USDA１１０＋
               根瘤鲜质量相对于 CK 显著增加, 比单接种 HH２９ HZP１ 比未接种大豆的固氮酶活、 根瘤数及根瘤鲜
               时植株根瘤数、 根瘤鲜质量和地上部鲜质量分别增                         质量显著增加.双接种时大豆植株地上生物量也有
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