Page 22 - 《华中农业大学学报》2025年第1期
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               之一  ［13］ 。                                       中，于 25 mA 恒流下电泳约 5 h。电泳后，将凝胶板
                   近年来，随着小麦品质改良越来越受到育种家                         置于 0.05%（m/V）考马斯亮蓝溶液中 8~10 h，然后
               的重视，研究小麦 HMW-GS 的类型和亚基组成对品                       用水脱色 10~12 h。HMW-GS采用 Payne等          ［17］ 命名
               质遗传改良具有重要的意义。蒋云等                  ［14］ 对四川省      法进行分类，以已知 HMW-GS 带型的中国春［CK1，
               184 份小麦审定品种的 HMW-GS 组成进行研究，指                     N/（7+8）/（2+12）］和 中 优 9507［CK2， 1/（7+9）/
               出与过去几十年相比，四川省小麦品种 HMW-GS 改 （5+10）］为对照。HWM-GS 亚基评分参考 Payne
               良成效明显，改良前四川省小麦 HMW-GS 组成以                        等 ［17］   的 评 分 标 准 ，HMW-GS 所 对 应 分 值 如 表 1
              ［Null/（7+8）/（2+12）］为主，如今优质强筋亚基类                   所示。
               型 1 亚基和 5+10 亚基的频率逐步上升，出现频率分                                表1 HWM-GS品质评分标准
               别达到 59% 和 56%；耿惠敏        ［15］ 对 714 份河南省小麦          Table 1 Standard of quality scores of HWM-GS
               品种进行品质分析，发现河南省 Glu-1位点等位基因                       品质得分    Glu⁃A1位点      Glu⁃B1位点      Glu⁃D1位点
                                                                 Quality
               多样性较低，优质亚基 14+15、13+16）和 5+10占比                         Glu⁃A1 locus   Glu⁃B1 locus  Glu⁃D1 locus
                                                                  scores
               较少， HMW-GS 组成虽然较为丰富，但是优质亚基                          4                                5+10，5+12
               组合类型少，总体品质得分低。本研究以 121份中国                                             7+8，17+18，
                                                                   3      2*，1
               小麦地方品种为供试材料，利用 SDS-PAGE 技术对                                           13+16，14+15
                                                                   2                    7+9            2+12
               HMW-GS 的类型进行鉴定，同时对不同亚基的组成
                                                                   1      Null          6+8，7          4+12
               进行评价，以期挖掘具有应用价值的 HMW-GS 组合
                                                                  －                    22，7*+8        2+10，
               类型，筛选出优质小麦地方品种资源，为我国小麦品                                                                1.5*+10
               质改良提供基因资源和参考依据。                                   注：“－”表示该亚基评分标准暂时未确定。Note：“－” in the
                                                                quality score of subunits have not been determined.
               1 材料与方法
                                                                1.4 HWM-GS等位基因变异类型命名
               1.1 试验材料                                             本研究中对 HWM-GS 等位基因变异类型命名
                   试验材料为华中农业大学植物科学技术学院麦                         参照Payne等   ［18］ 的方法。
               类作物课题组近年来从全国收集到的 121 份小麦地                        1.5 数据处理及分析
               方品种，于 2021-2022 年种植于华中农业大学麦作                         利用 Excel 对数据进行统计处理，利用 MEGA-
               试验田。田间采用随机区组设计，每份材料按 3行区                         X软件进行系统聚类分析。
               种植，行长 2 m，行距为 20 cm，株距为 10 cm，3 次重
               复，按照小麦大田生产进行田间管理。                                2 结果与分析
               1.2 小麦籽粒蛋白质的提取                                   2.1 小麦地方品种HMW-GS等位基因变异类型
                   参照 Wang 等   ［16］ 的方法进行小麦籽粒蛋白质的                   利用 SDS-PAGE 对 121 份小麦地方品种材料的
               提取。每份材料选择 3 粒大小均匀一致的种子放入                         HMW-GS 组成进行分析，各品种对应的 HMW-GS
               研磨机（Tissue Lyser II）中粉碎，将提取到的 40 mg              组成如表 2 所示，121 份小麦地方品种在 Glu⁃1 位点
               粗粉加入 600 μL SDS-PAGE 样品缓冲液中（62.5                 上共检测出 18 种等位基因变异类型，其中在 Glu⁃A1
               mmol/L Tris-HCL，pH 6.8，2% SDS（m/V），10% 甘         位点检测出 3 种等位基因变异类型，Glu⁃B1 上共检
               油（V/V），5% 2-巯基乙醇（V/V），0.002% 溴酚蓝                 测出 9 种等位基因变异类型，Glu⁃D1 位点上共检测
              （m/V）中，连续涡旋搅拌 2 min，摇匀 30 min，置于                  出 6 种等位基因变异类型（表 3），部分品种等位变异
               90 ℃沸水浴5 min。                                    的SDS-PAGE图谱如图1所示。
               1.3 SDS-PAGE方法                                       Glu⁃A1 位点检测出 Glu‐A1a、Glu‐A1b 和 Glu‐
                   参照 Wang 等   ［16］ 的方法进行 SDS-PAGE 分析。 A1c 3 种等位基因变异类型所对应的亚基分别为 1、

               将获得的小麦蛋白质放置在高速离心机上 13 000                        2* 和 Null，出 现 的 频 率 分 别 为 19.01%、2.48% 和
               r/min 离心 5 min，取 8 μL 上清液进行 SDS-PAGE 分           78.51%；在 Glu‐B1 上共检测出 9 种等位基因变异类
               析。SDS-PAGE 用 12%（m/V）的流动凝胶和 4% 的                 型，其中等位基因 Glu‐B1b（对应的亚基类型为 7+8）
               堆积凝胶进行。在 1 倍 Tris-甘氨酸的电极缓冲液                      出现频率最高，为76.86%，而等位基因变异类型Glu‐
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